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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則

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[求救] WB 背景超黑

[ Biotech ]37 留言, 推噓總分: +6

作者: kuyar - 發表於 2016/05/17 21:57(8年前)

5^F推bluecsky: 有沒有多load一個必定成功的來做對照組?05/18 06:10

6^F→bluecsky: 因為如果blocking沒問題 antibody也是一樣的那有時黑05/18 06:11

7^F→bluecsky: 有時乾淨有沒有可能是因為你的sample的訊號強度不夠05/18 06:11

8^F→bluecsky: 造成相對的髒?不過你壓片時間都一樣這樣也怪怪的05/18 06:13

9^F→bluecsky: 如果可以把成功的圖跟失敗的圖貼上來或許更容易有解答05/18 06:14

[求救] 請問維他命A要去哪買?

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +1

作者: milkcake - 發表於 2012/07/01 14:55(11年前)

4^F→bluecsky:sigma不就友和代理的...?07/01 17:36

[閒聊] western中transfer的濾紙

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +13

作者: beflying - 發表於 2012/05/28 18:14(12年前)

3^F→bluecsky:圖畫紙也可以阿(認真)...據說老闆他們古早時代也是圖畫紙05/29 08:19

4^F推bluecsky:當然啦如果沒必要克難到這樣就沒必要去嘗試照舊就好05/29 08:21

[求救] 將建構好的質體放入expression host

[ Biotech ]27 留言, 推噓總分: +7

作者: lier1986 - 發表於 2012/02/15 18:37(12年前)

25^F推bluecsky:可能你的蛋白有毒 promoter又關不緊可以嘗試在培養基中02/18 09:06

26^F→bluecsky:加入抑制promoter表現的東西或是換一下培養的溫度02/18 09:07

27^F→bluecsky:降低他的表現量或許就會長出來了02/18 09:07

[閒聊]Glucose與表達蛋白

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +2

作者: liquidwater - 發表於 2012/02/11 15:51(12年前)

1^F推bluecsky:要看你要表達的蛋白是用什麼promoter才是重點吧02/12 16:56

2^F→bluecsky:除非你是想用原始promoter 才會因為glucose而誘發表現02/12 16:57

3^F→bluecsky:如果你是接在gal promoter上那就是要用IPTG誘導他了02/12 16:57

4^F→bluecsky:而且你也沒說清楚你表達後的目的是?測是否有表達?純化?02/12 16:58

6^F推bluecsky:那麼就是要去測試最佳誘導的條件作各種不同條件去測吧02/13 00:03

7^F→bluecsky:一般調整法有調IPTG濃度時間溫度等等02/13 00:03

[求救] 又是ligation

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +5

作者: ennnnno - 發表於 2012/02/07 16:38(12年前)

17^F推bluecsky:傳統法抽的plasmid其實純度比較差不然kit怎麼賣..02/12 17:01

[求救] Western transfer

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +7

作者: martyrtitan - 發表於 2011/12/19 00:56(12年前)

13^F推bluecsky:連marker都湖就是條件有問題了,大Kda是會比較難轉過去12/20 14:25

14^F→bluecsky:但是不可能會影響到你的marker,重新確認一次所有的條件12/20 14:25

15^F→bluecsky:然後放冷房或冰箱跑,可以的話就用o/n的條件跑會更好12/20 14:26

16^F→bluecsky:至於電流開多大就看你tank多大,然後去查一下就知道了12/20 14:26

[求救] cloning已經做了5個月...

[ Biotech ]58 留言, 推噓總分: +9

作者: lier1986 - 發表於 2011/11/14 15:07(12年前)

21^F推bluecsky:我不知道你一管裝多少以前lab做都是上百管一次做的11/15 07:24

22^F→bluecsky:所以速度不是最大問題我倒覺得問題可能出在前面的步驟11/15 07:25

23^F→bluecsky:或者更可能最原始拿到的sotck菌已經有問題了所以一路錯11/15 07:25

24^F→bluecsky:另外電穿孔的機器條件設定你有確認正確嗎?弄錯也是掛歐11/15 07:26

42^F推bluecsky:他的意思是你的kit可能有問題可以商界別人家的kit試看看11/17 10:15

43^F→bluecsky:一般PCR product做TA clone成功率應該不低才是正常的11/17 10:16

44^F→bluecsky:competent cell protocol我都參考molecluar cloning做的11/17 10:16

Re: [求救] 如何利用抗體辨認純醣鏈?

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +5

作者: boblu - 發表於 2011/10/07 20:38(12年前)

13^F推bluecsky:逼阿扣超貴的比你這方法可能還貴...10/08 18:44

[討論] vector切完之後

[ Biotech ]29 留言, 推噓總分: +4

作者: ennnnno - 發表於 2011/10/07 12:29(12年前)

22^F推bluecsky:要分circular跟linear其實跟跑的速度比較有關..10/07 17:18

23^F→bluecsky:你電壓都開80 100v去跑跑長膠也還是黏在一起10/07 17:19

24^F→bluecsky: 不過正確說法是 v/cm這比例膠夠長同電壓這比例就會降10/07 17:19

25^F→bluecsky:好吧其實定電壓下跑長膠好像也是對的 (錯亂了抱歉)10/07 17:20

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