[閒聊]Glucose與表達蛋白

看板Biotech作者 (飛得越高是給越多人看)時間12年前 (2012/02/11 15:51), 編輯推噓2(2推 0噓 5→)
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正在用BL21(DE3)表達Glycolysis中的某一個蛋白 加入IPTG後 表達效果很差 是需要加入glucose來抑制細菌去代謝Lac Gal等替代能源 才會使細菌走Glycolysis這條路嗎 謝謝 多年前有做過類似實驗 但現在不太記得細節了 -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.41.40.192
推
02/12 16:56, , 1F
要看你要表達的蛋白是用什麼promoter才是重點吧
02/12 16:56, 1F
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02/12 16:57, , 2F
除非你是想用原始promoter 才會因為glucose而誘發表現
02/12 16:57, 2F
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02/12 16:57, , 3F
如果你是接在gal promoter上 那就是要用IPTG誘導他了
02/12 16:57, 3F
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02/12 16:58, , 4F
而且你也沒說清楚你表達後的目的是?測是否有表達?純化?
02/12 16:58, 4F
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02/12 20:32, , 5F
測試表達 接在lac promoter上
02/12 20:32, 5F
推
02/13 00:03, , 6F
那麼就是要去測試最佳誘導的條件 作各種不同條件去測吧
02/13 00:03, 6F
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02/13 00:03, , 7F
一般調整法有調IPTG濃度 時間 溫度 等等
02/13 00:03, 7F
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