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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則

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[求救]電泳一定跑得出限制脢切的兩個片段嗎？？

[ Biotech ]25 留言, 推噓總分: +11

作者: ppta - 發表於 2007/12/17 23:07(16年前)

2^F推bluecsky:理論上..615的要比245的亮才正常吧?..還有你gel幾%?12/17 23:10

7^F推bluecsky:假如615就很weak..245自然很難看到..12/17 23:46

請教一下western blotting的原理@@

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +7

作者: scad528 - 發表於 2007/12/17 12:48(16年前)

4^F推bluecsky:這個就算不翻課本會上網去google一下就一大堆了12/17 18:53

[求救]104bp和86bp分得開嗎？？？

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +9

作者: ppta - 發表於 2007/12/13 21:47(16年前)

9^F推bluecsky:我跑過6%的agarose..12/15 19:30

Re: [求救] cloning 救郎喔~~

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +4

作者: bluehttp - 發表於 2007/12/12 10:23(16年前)

2^F推bluecsky:我overnight都用4度C12/12 12:54

3^F→bluecsky:加熱是因為BUFFER會有沉澱的關係吧12/12 12:55

Re: [求救] 請問一名詞

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +2

作者: rick0622 - 發表於 2007/12/08 14:06(16年前)

1^F推bluecsky:SDS-PAGE需要blocking?你是說western blot吧12/08 14:21

3^F推bluecsky:當然有阿..western blot的membrane在做完transfer後12/09 12:05

4^F→bluecsky:要先做blocking的步驟..我記得好像是要檔掉一些12/09 12:06

5^F→bluecsky:non-specific site的樣子..可能有記錯還是查一下比較好12/09 12:06

Re: [求救] 關於利用P. pastoris表現的問題?

[ Biotech ]1 留言, 推噓總分: +1

作者: zyxz - 發表於 2007/12/02 13:45(16年前)

1^F推bluecsky:推你心酸的結論...12/02 14:16

Re: [求救] 接好的plasmid切不出小片段來

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +3

作者: meiosisLin - 發表於 2007/11/30 23:55(16年前)

1^F推bluecsky:這方法是快速粗萃取plasmid..不過還是要一個o/n..12/01 12:24

2^F→bluecsky:個人認為最快的還是用PCR..可惜的是false positive也多12/01 12:25

3^F→bluecsky:不過這方法取出來的都很...雜..看個人習慣使用吧12/01 12:25

5^F推bluecsky:同意~~做的出來才是重點..12/01 17:46

[求救] Plasmid抽出來以後不久後卻消失了？

[ Biotech ]27 留言, 推噓總分: +12

作者: njp13 - 發表於 2007/11/30 19:53(16年前)

1^F推bluecsky:ㄟ..你抽plasmid最後回溶於什麼?TE?水?11/30 19:59

2^F→bluecsky:我以前遇過一種很囧的狀況..我回溶的水似乎有污染11/30 20:01

3^F→bluecsky:結果我的plasmid都被切成碎碎的小片段..= =11/30 20:02

4^F→bluecsky:後來換過水就好了..還有你說跑gel很亮?..能拿張圖來看嗎11/30 20:02

5^F→bluecsky:要是真的濃度低很簡單阿..多抽幾管給他濃縮就好XD11/30 20:03

6^F→bluecsky:可是有時候把DNA送太濃給人定序反而跑的結果很糟= =11/30 20:04

7^F→bluecsky:此外你一次跑gel都load多少plasmid去跑?11/30 20:05

15^F推bluecsky:哈..說老實話這種濃度其實不算高阿XD..直接送菌液吧11/30 20:46

Re: [求救] 接好的plasmid切不出小片段來

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +5

作者: bluecsky - 發表於 2007/11/30 16:06(16年前)

5^F推bluecsky:不一定啦..可以一樣也不用一樣..照說明書的用大多都可以11/30 19:53

7^F推bluecsky:哈..所以基本上我很少做RE確認..是說應該用不到真的1ul11/30 21:33

8^F→bluecsky:我老闆只要data..經費都給的滿充裕的11/30 21:34

[求救] 接好的plasmid切不出小片段來

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +3

作者: foureyes - 發表於 2007/11/30 15:01(16年前)

1^F推bluecsky:false positive...11/30 15:56

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