[求救]電泳一定跑得出限制脢切的兩個片段嗎??

看板Biotech作者 (幸福的瞬間)時間18年前 (2007/12/17 23:07), 編輯推噓11(11014)
留言25則, 8人參與, 最新討論串1/1
如題,918bp應該切出615 245和58bp的,但我的電泳只看得到615,這樣是不是做錯了? 理論上有切出615應該還要有245的吧,而且亮度要一樣是嗎? paper是寫58bp看不到,但245咧?這樣能判斷嗎?謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.69.153.120 ※ 編輯: ppta 來自: 210.69.153.120 (12/17 23:08)

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你的gel是幾%的~
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理論上..615的要比245的亮才正常吧?..還有你gel幾%?
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2%的,還是因為我的BAND太微弱,615已經弱了,所以
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245看不到?
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這個版好溫馨 人數少少的 回答數度比某些幾百人大版還快
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嗯!!你的band太弱了~再試試吧~你去切的可能再加一點!加油
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假如615就很weak..245自然很難看到..
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妳有嘗試去跑你pcr產物嗎??也許該調整一下條件吧!!
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是喔?各位高手認為有看到615不能研判型別嗎?
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你原來的DNA的量太少才會這樣,請試著加大原來DNA的量試。
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另為另一種型別切成860跟58BP
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不能因為我跑出615就研判型別嗎?謝謝
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會有問題!也會被質疑!因為你說你的615太淡!所以建議再調整
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因為我現在是在職生,所以比較沒時間做實驗
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想知道這樣能研判嗎?感恩啊
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band太淡~被提出質疑的機率很大!該出來的band都出來才能正
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確判讀~~~~當自己沒辦法確定時!怎麼說服別人呢~對吧!
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615很淡的話 245有可能會看不到 2%的膠正常可以看到245的
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除非你有跑跳海XD
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另外 2%的膠100bp左右的也看的到喔~
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染色的方法及時間也會影響到觀察,小片段容易在染色時擴散똠
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開而看不見,建議在做膠時直接將ethidium bromide加進去,
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然後先空跑十分鐘再加入樣品,跑完直接觀察,可能比較容易
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觀察到小分子量片段.
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用哪種enzyme阿 至少要提一下吧
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文章代碼(AID): #17Pf2lib (Biotech)