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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則

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請問一個關於蛋白純化的問題

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +2

作者: mournermind - 發表於 2008/02/14 17:23(16年前)

1^F推bluecsky:一切都是case by case..你要先不停的用少量去測試條件02/14 19:56

2^F→bluecsky:抓好一個最恰當的條件就可以了..當然你純化目的不同也02/14 19:57

3^F→bluecsky:會有不同的需求..起始imidazole用10~20 mM試試02/14 19:57

4^F→bluecsky:接者可以試40 80..大多100多就都流光了..也有到25002/14 19:58

5^F→bluecsky:wash的量一樣要自己抓..可以先試試4倍column體積02/14 19:59

6^F→bluecsky:不夠乾淨就再洗多一點..就是這樣..一步一步去找條件吧02/14 19:59

7^F→bluecsky:我說的10~20 40 80是wash的..elution從100開始吧..02/14 20:00

8^F→bluecsky:elution也可以直接都用最高的條件去洗..只是有的很神奇02/14 20:00

9^F→bluecsky:100被洗出來..250洗不太出來(我聽人說的)..一切都是謎阿02/14 20:01

[討論] transfection時plasmid的大小

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +3

作者: eyespot - 發表於 2008/01/30 23:32(16年前)

2^F推bluecsky:是的...大的plasmid效率就是有差01/31 06:59

[討論] Western blot電泳時的band很怪

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +5

作者: lagigi - 發表於 2008/01/27 16:11(16年前)

1^F推bluecsky:sample buffer加後煮過不是都要離心嗎?01/27 17:42

2^F→bluecsky:原因不是你的buffer問題..而是本身就有一些東西會沉殿吧01/27 17:42

3^F→bluecsky:不離心去跑都會這樣..光是load的感覺就差很多01/27 17:43

6^F推bluecsky:我是用全速(約16k G)離心5min啦..我一開始學就被教一定要01/27 18:16

7^F→bluecsky:做這一步說?..是很奇怪嗎?每次離後底部都有一些沉澱沒錯01/27 18:17

8^F→bluecsky:而且我也試過沒離心就用就真的會怪怪的..01/27 18:17

9^F→bluecsky:不管是load的感覺跟跑的結果都有差01/27 18:18

[求救] flag-tagged protein expression

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +3

作者: anchi35 - 發表於 2008/01/26 14:26(16年前)

1^F推bluecsky:antibody會不會用太多?1:500耶..太多的話雜band也會多阿01/27 12:27

2^F→bluecsky:這種訂來的量跟純度都夠..不需要這麼多吧01/27 12:28

Re: [求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?

[ Biotech ]2 留言, 推噓總分: +1

作者: cloneting - 發表於 2008/01/23 20:57(16年前)

1^F推bluecsky:哈..我只是有過不好的經驗所以很怕這種的cloning01/23 22:18

2^F→bluecsky:不過說真的做久了就覺得條件都沒有一定啦..憑直覺XDD01/23 22:18

Re: [問題] TOPO cloning

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +4

作者: bluecsky - 發表於 2008/01/23 08:15(16年前)

2^F→bluecsky:我用的TOPO是有amp跟kan這兩種..01/23 11:56

Re: [求救] Cloning 的問題

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +1

作者: cyken - 發表於 2008/01/22 00:18(16年前)

3^F推bluecsky:沒錯..單一RE site cloning麻煩多多..01/22 04:18

[求救] 請問蛋白質的分析法

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +6

作者: cc200711 - 發表於 2008/01/20 20:07(16年前)

1^F推bluecsky:antibody可以自己做阿..把那蛋白質純化去打兔子之類的01/21 01:36

4^F推bluecsky:打兔子然後就放他的血來用阿..裡面就有抗體了..01/21 14:58

8^F推bluecsky:sGoat大..我覺得這只是作業而已..XD01/21 22:10

[求救] 請問點片機價格

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +3

作者: gray43 - 發表於 2008/01/16 00:19(16年前)

3^F推bluecsky:可以直接打去廠商詢價阿01/16 15:43

Lehninger 中譯本

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +7

作者: hebebaby - 發表於 2008/01/15 13:17(16年前)

2^F推bluecsky:都要先念了為啥不買原文書..01/15 13:47

5^F推bluecsky:是歐...看來又要買新書了哈哈01/15 21:42

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