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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則
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[討論] cell culture用的meduim量
[ Biotech ]50 留言, 推噓總分: +13
作者: sunnyforever - 發表於 2010/05/24 18:17(14年前)
41Fbluecsky:壓細胞真是新的說法 應該好好研究一下05/25 19:02
[求救]關於 長片段的TA-cloning
[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +4
作者: DJHINN - 發表於 2010/05/22 02:35(14年前)
2Fbluecsky:因為你合起來大概快10k 有時候比較大要一點運氣05/22 05:05
3Fbluecsky:可以嘗試heat shock時間拉長跟recovery時間拉長05/22 05:06
[求救] 利用Glutathione的還原及氧化態refolding蛋白
[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +1
作者: bolly - 發表於 2010/05/22 00:09(14年前)
4Fbluecsky:很多東西要掰也是可以掰出一套道理 然後也是always一堆05/22 15:16
5Fbluecsky:例外 特例 最後常常還是...try and error...05/22 15:16
6Fbluecsky:你可以根據蛋白序列阿 結構阿 這些來下手 大概都從這裡開05/22 15:17
7Fbluecsky:始作一些簡單的"理論"推估 不過這種推估常常嘛..恩05/22 15:18
[求救] 如何將空vector轉大量?
[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +3
作者: championelmo - 發表於 2010/05/21 17:49(14年前)
1Fbluecsky:答 : 就是隨興所至 要不然直接把competent cell丟到那個05/21 17:59
2Fbluecsky:空管子去也可以 單純的plasmid去transform效率一般都很高05/21 18:00
3Fbluecsky:不過不要加太多就是了 看你開心 不要加個1ml就好了..05/21 18:00
4Fbluecsky:其實要是不是空管子的話 取各1ul就很夠拿來轉了..05/21 18:01
9Fbluecsky:其實你也可以不要全部的pellet都塗下去阿..05/21 19:25
10Fbluecsky:雖然說只要幾ng就很夠了 不過我也不知道他說得很少05/21 19:26
11Fbluecsky:是多少 是體積都少到沒得吸那種 還是...?05/21 19:26
12Fbluecsky:不然其實去定各量也不錯 雖然做久了都不太管這個XD05/21 19:27
13Fbluecsky:一般transform純plasmid的話 我是不會把菌全部都塗下去05/21 19:27
19Fbluecsky:可以定量阿 很少體積的話 去看有沒有naoa-drop05/21 22:33
20Fbluecsky:我倒覺得你不用想得太多 就取一點點去轉 要是怕長太多05/21 22:34
21Fbluecsky:你轉完後就不要全部的菌都塗盤就好...05/21 22:34
[求救] 關於酵母菌同源重組!
[ Biotech ]1 留言, 推噓總分: +1
作者: GDSPY - 發表於 2010/05/19 17:15(14年前)
1Fbluecsky:40夠了05/19 19:20
[求救] 封PAGE膠片的年糕紙哪裡買?
[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +7
作者: hc0122 - 發表於 2010/05/16 16:16(14年前)
1Fbluecsky:沒牌子的小雜貨店...05/16 16:34
Re: [求救] Western blot - ECL
[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +2
作者: wellbeing25 - 發表於 2010/05/12 17:28(14年前)
7Fbluecsky:跟樓上作法差不多 另外paper先瀝乾一下 之後放上去後05/13 21:43
8Fbluecsky:在稍微壓平一下 把多餘的ECL壓到paper外 再去壓片05/13 21:44
9Fbluecsky:會比較漂亮一點 個人經驗啦..至少要瀝乾05/13 21:44
[求救] Western blotting的問題
[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +2
作者: fhejkh - 發表於 2010/05/12 00:14(14年前)
2Fbluecsky:這不算是WB的問題 這就是跑PAGE就會面對到的問題05/12 04:30
3Fbluecsky:選擇原則很簡單 就是最適合的大小 主要看你蛋白分子量05/12 04:31
4Fbluecsky:跟跑DNA電泳一樣 要選適合%來做 因為resolution的問題05/12 04:31
5Fbluecsky:講白一點就是 希望盡量讓你主要要看得band能在中間附近05/12 04:32
6Fbluecsky:因為那附近的resolution最好 分得最開05/12 04:32
Re: [閒聊] 板上做 protein純化的版友(FPLC)
[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +8
作者: Fourfish - 發表於 2010/05/10 12:40(14年前)
9Fbluecsky:我們lab老闆要求是最好兩周洗一次 不過..XD05/11 08:28
[閒聊] 板上做 protein純化的版友(FPLC)
[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +1
作者: hellheavn - 發表於 2010/05/10 01:59(14年前)
1Fbluecsky:不懂可以打電話去問廠商的技術專員阿 一台這麼貴的東西05/10 07:03
2Fbluecsky:有問題還是問原廠 或是參考手冊 至少到時候這樣做出問題05/10 07:04
3Fbluecsky:老闆方面也才比較不會怪你怎麼不先問原廠05/10 07:05
4Fbluecsky:我只用過一兩次 我只知道不能打入氣泡 使用後要洗05/10 07:05
5Fbluecsky:定期要洗一次20%還25%酒精05/10 07:06