[討論] cell culture用的meduim量

看板Biotech作者 ( )時間14年前 (2010/05/24 18:17), 編輯推噓13(13推 0噓 37→)
留言50則, 20人參與, 最新討論串1/1
實驗是用10cm dish 上次在繼代時 我加入10ml medium 被實驗室的人說浪費亂加 說只要5ml就好 我說 剛繼代應該細胞要比較好的營養 medium太少很容易變黃且細胞可能會長不好 聽說medium加這麼多會壓到細胞長不好 我蠻疑惑的 請問這是真的嗎? 若只是想要省medium我可以理解 後來有個同學聽別人說過 加10ml會讓貼附的細胞距離氧氣比較遠 不容易吸收到氧氣 請問版上的大大有什麼建議嗎=.= -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.25.156
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05/24 18:37, , 1F
我們家的也是加5ml，10ml太多了 細胞會長不好
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我猜哪是因為你們老師也是用猜的
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如果繼代要長得好 為什麼不提高medium的濃度 而是提高量
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恩 我只是想知道是不是有10ml太多壓到細胞生長
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或是因為距離空氣太遠而長不好的說法
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因為我看書上或是一般其他人做 都是8~10ml
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推
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5應該只是薄薄的一層剛好蓋過..
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10cm+10 15cm+20 太少medium對代謝旺盛的細胞無法
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平衡pH值才比較傷吧
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我想省medium還被助理念說加太少細胞長不好，要我加15ml= =
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我們LAB是加5-6ml,反正加太多容易傾斜逸出來
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老師是跟我說過,medium的養份其實都是過量的
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個人覺得你老闆是那5ml 數字是瞎說的 沒啥根據
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一般使用方法建議量不會這麼少
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但你的細胞這麼不容易死的話 是有可能可以活的好
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我的經驗這麼少的培養液會養到部分區域乾掉
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我們用8ml
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推
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八分哲學
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我們平常養用8-10 有加藥等其他處理時用5
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medium太多細胞被壓？？ 第一次聽到勒
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你的細胞會托夢給你：我的背上好重啊...
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推
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說會壓到細胞長不好的,sense有問題~想省錢就直說~還壓勒
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推
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別再相信沒有根據的說法了
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11531那篇推文的網址,真的是很好的課
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打錯 是11513
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05/25 10:51, , 26F
謝謝大家的意見~
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推
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我記得組培的書有寫 medium液面高度影響氣體交換的速率
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推
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別再相信沒有根據的傳說了...10cm dish可以加到15ml
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一般建議液高約0.2mm 所以T25要加5ml T75則加15ml
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只是為了省medium我都加6ml 如果放三天會加到8ml
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圓形10cm dish加10ml都有點嫌少了
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推
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各種細胞用的medium濃度是固定的,提高濃度會改變滲透壓
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只放薄薄的一層 要考慮到蒸發的問題 對濃度影響較大
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一般在dish或flask裡養的細胞 即使長滿養分都夠放好幾天
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但要考慮細胞產生的代謝物和pH的下降
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推
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以上就是為什麼大家都行之有年的用8-10ml去養10cm dish
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而不做一些奇奇怪怪的改變
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你就先看組培的書 然後照老闆的話去做順便錄音
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等到實驗有問題時在拿組培的書跟老闆說
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細胞被壓這種話聽起來真的很猛
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推
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壓細胞真是新的說法 應該好好研究一下
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推
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液面高度並非絕對~像藥物處理或transfection時,就常改變
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推
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10cm dish面積為78.5cm^2 5mL體積下液高0.063cm
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10mL體積下液高0.127cm 人類細胞直徑為10-30uM
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取中間值的話 5mL跟10mL對細胞增加的壓力為
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1.13X10^-5 g 不知道對細胞重不重?
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10cm dish的實際面積約為57cm^2
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推
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另外根據Freshney的Culture of Animal Cells內容提到..
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高需氧的細胞建議0.2mL/cm^2 低需氧的細胞則可0.5mL/cm^2
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推
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原來內徑才4.2cm
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※ 編輯: sunnyforever 來自: 140.116.192.147 (05/26 00:14)
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