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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則

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[討論] 有關southern 探針純化用的管柱

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +6

作者: boyo - 發表於 2010/09/30 21:41(13年前)

2^F推bluecsky:我待的Lab是用GE的(不過是用重力分離的cloumn)10/01 00:32

3^F→bluecsky:洗不乾淨到底是什麼問題? 我大多收第二管就是乾淨的probe10/01 00:33

4^F→bluecsky:之後就直接丟了cloumn不是嗎? 難道你們有reuse??10/01 00:34

[求救] 有誰知道ABI的real-time PCR 那裡可以維修?

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +4

作者: yueh614 - 發表於 2010/09/24 17:22(13年前)

10^F推bluecsky:這種還是送原廠得好不然非原廠弄壞他們也不會管你09/27 23:21

[討論] 請問各位做western最多stripe 幾次

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +7

作者: reinherd - 發表於 2010/09/20 23:17(13年前)

4^F推bluecsky:最多壓到三四次五次以上是怕訊號變的很弱09/21 06:42

[求救] 請問ECL液可以重覆使用嗎？

[ Biotech ]22 留言, 推噓總分: +4

作者: yesdora - 發表於 2010/09/20 18:40(13年前)

9^F推bluecsky:混合後不能保存再使用吧..但是一次混合沾多片是可以的09/20 20:59

10^F→bluecsky:能沾幾片就要稍微自己經驗嘗試廠商大多是跟你說大概涵蓋09/20 21:00

11^F→bluecsky:面積能有多少信或不信也是看你摟..09/20 21:00

[求救] 請問蛋白質的定量？

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +4

作者: seeing - 發表於 2010/09/18 23:41(13年前)

8^F推bluecsky:看一些蛋白有一些會滿容易沉殿的09/20 07:29

9^F→bluecsky:不過大多可溶的蛋白是沒這問題才對除非你濃度特高09/20 07:29

[方法] 請問western 的transfer buffer

[ Biotech ]22 留言, 推噓總分: +5

作者: spirithorse - 發表於 2010/09/08 00:34(13年前)

2^F推bluecsky:你要transfer很大的分子量的蛋白嗎?09/08 06:12

14^F推bluecsky:70~80KD完全不用加SDS...用一般條件放cold room跑就好09/08 14:18

15^F→bluecsky:一般buffer就跟你用的差不多阿..09/08 14:19

18^F推bluecsky:幾% gel? 沒marker我看不太懂哪裡慘 orz09/08 19:35

19^F→bluecsky:當然你加2%SDS的是滿慘的啦XD09/08 19:35

20^F→bluecsky:歐歐這是transfer完後的PAGE歐..那還真的是..09/08 19:36

21^F→bluecsky:我們lab是直接400mA 4hr 在cold room跑都很ok09/08 19:37

[閒聊] 詭異的 PBS 滅菌方式

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +11

作者: homer0331 - 發表於 2010/09/06 19:31(13年前)

4^F推bluecsky:你加藥的環境是無菌的嗎? 你的藥品都確定無菌處理過了嗎?09/06 22:36

5^F→bluecsky:不是的話就算水是無菌也沒用阿不然大家拿滅菌水配藥就好09/06 22:37

6^F→bluecsky:幹嘛還浪費filter的錢XD09/06 22:38

[求救] 如何使用chitin bead 純化?

[ Biotech ]24 留言, 推噓總分: +5

作者: jj5110 - 發表於 2010/08/30 16:36(13年前)

1^F推bluecsky:你用哪一種intein?08/30 19:16

2^F→bluecsky:方法與步驟一般純化沒有絕對的標準程序都要看你case08/30 19:16

3^F→bluecsky:當然也不能說沒有一個標準做法你可以參考做過的paper08/30 19:17

4^F→bluecsky:或是官方的一些條件然後自己修改來配合你的東西08/30 19:17

5^F→bluecsky:因為你說的不清不楚連表現的host 使用的tag都沒講清楚08/30 19:18

6^F→bluecsky:目標蛋白多大? 你做過可溶性測試沒有?08/30 19:18

7^F→bluecsky:CBD tag一般前面都接了intein 之後elute是靠intein自切08/30 19:19

8^F→bluecsky:來做elute 但是intein很多種你是用哪一種?08/30 19:19

10^F推bluecsky:我不太懂的另一點就是加熱要幹嘛一般DTT可以誘導intein08/30 21:46

11^F→bluecsky:的自切反應然後反應完後就是elute拿到要的蛋白08/30 21:46

12^F→bluecsky:之後就用酸鹼把beads洗一洗就可以再reuse 加熱是..?08/30 21:47

13^F→bluecsky:閒蛋白太強了要給他一點挑戰嗎?08/30 21:47

18^F推bluecsky:那加熱後beads不就報銷了?08/31 00:36

[求救] 很短片段的定序

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +3

作者: siberianiris - 發表於 2010/08/23 22:31(13年前)

8^F推bluecsky:直接合成吧他還會幫你定序這麼短合成的錢也不貴08/28 17:41

[求救] 把competent cell冰在-20了...

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +4

作者: bloodsuckant - 發表於 2010/08/10 21:54(13年前)

8^F推bluecsky:其實買的也沒多貴啦買來的效率大多比自己做得好08/13 07:48

9^F→bluecsky:不過一般自己做就好了凱一點的lab才會用買的08/13 07:49

11^F推bluecsky:可是沒有人為了做一個e.coli transformation而當天做吧XD08/13 18:57

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