[求救] 請問ECL液可以重覆使用嗎？
[B
想請問也有在做western blot的版友們
新手上路，遇到不少問題還請大家教教我！
我實驗室的步驟是電泳後，transfer到PVDF膜上
1抗隔夜、TBST洗淨、2抗45分鐘、TBST洗淨、ECL(GE Healthcare)1、2液混合靜置1分
之後夾到塑膠片內，拿去照相。
所有的步驟都沒有在暗房操作。
到目前為止大概想得到的band都有照出來。
我想請問的是ECL液是不是只能使用一次就不行了呢？
因為最近都同時2片一起跑，操作時間相隔20~30分鐘左右
看了說明書也沒特別寫到能不能重覆使用，有提到在常溫下1小時內穩定。
但應該是非混合狀態下吧…我完全不確定。
昨天有給它試著沾第2片，拍是有拍出來，但不曉得是target protein不明顯還是這緣故
band實在不是很明顯…
問了畢業的學姐，她說ECL不行，但ECL plus可以重覆使用3次左右
另外還想問的是…
1> ECL1、2液混合後、靜置時需要遮光比較好嗎？(我目前是都蓋鋁箔紙…)
2> ECL plus若要重覆使用，請問該怎麼保存比較好呢？
第2、3次使用時除了靜置時間加長外還有什麼要注意的嗎？
還有今天在做新的1抗時，因為一次做2支，1支加了抗體之後沒有馬上做記號
去拿個筆回來就忘了自己到底加到哪支去了…(真是有夠蠢的我知道@@)
看老半天完全看不出來…
有什麼方法可以分辨的嗎？？
謝謝大家的指教…
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