[討論] 請問各位做western最多stripe 幾次

看板Biotech作者 (揚威利信徒萊因哈特)時間13年前 (2010/09/20 23:17), 編輯推噓7(7推 0噓 6→)
留言13則, 8人參與, 最新討論串1/1
如題 因為我們實驗室過去有個不成文的規矩最多stripe三次 但是因為最近我要一次看很多基因, 所以想說能否一片membrane stripe個4次以上 這樣可以讓我少跑好幾次膠 請問各位版友最多stripe幾次呢? -- 我的blog 歡迎參觀 http://www.wretch.cc/blog/reinherd -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 161.253.96.25
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09/20 23:54, , 1F
我只敢兩次...membrane剪開比較好
09/20 23:54, 1F
推
09/21 00:36, , 2F
我stripping 三次,前兩次看gene 第三次看Lamin B1
09/21 00:36, 2F
推
09/21 01:04, , 3F
曾經試過5次~效過還可以~不過internal control最後壓就是
09/21 01:04, 3F
推
09/21 06:42, , 4F
最多壓到三四次 五次以上是怕訊號變的很弱
09/21 06:42, 4F
推
09/21 16:57, , 5F
剪membrane比較好 真的都同位置就多跑幾片...
09/21 16:57, 5F
推
09/21 23:38, , 6F
我玩過20幾次的（真的只是順便，想看極限）
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09/21 23:38, , 7F
不過那是SYNAPSIN I本身就強到爆才可以這樣，至於那個p-ERK
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09/21 23:39, , 8F
就....反正從弱的做到強就對了，另外推剪membrane
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09/22 12:52, , 9F
都是切成 strip 同時做很多個，不太 striping 的 >"<
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09/22 22:33, , 10F
看不太懂樓上想表達什麼.....
09/22 22:33, 10F
我大概懂樓上的意思 假設說 我要看三組基因 E-cadherin/beta catenin/Twist 我過去的做法是先probe Twist>stripe->E-cadherin>catenin>actin(ctrl) 但是 這三個基因加internal ctrl其實分子量差距很大 所以可以把membrane在blocking結束後直接切成四塊分別probe 這樣就不需要做stripping了 好方法 我下次要試試看 ptt果然就甘心ㄟ ※ 編輯: reinherd 來自: 161.253.96.25 (09/22 23:38)
推
09/25 00:15, , 11F
感謝原 po^^
09/25 00:15, 11F
推
09/25 00:20, , 12F
不過我 test 的時候在這樣做，如果是要 publish 的
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09/25 00:21, , 13F
我會乖乖的多跑幾片來做~ 請參考樓下 j 大文
09/25 00:21, 13F
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