作者 xy234786 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共80則

[討論] PVDF

[ Biotech ]25 留言, 推噓總分: +8

作者: xy234786 - 發表於 2017/10/25 19:25(6年前)

1^F→xy234786: https://i.imgur.com/NYQUOJc.jpg10/25 19:37

2^F→xy234786: 跟別人借這家來用10/25 19:37

3^F→xy234786: 而且不知道為什麼上半部的marker(大分子)都沒有transfer10/25 20:09

4^F→xy234786: 過去 @@ 都用同樣的條件同樣的transfer bufer10/25 20:09

9^F→xy234786: https://i.imgur.com/ssgCckb.jpg10/25 20:32

10^F→xy234786: 抱歉截錯圖了。是這才對^^10/25 20:33

11^F→xy234786: 是pvdf沒錯因為上面寫polyvinylidene difluoride10/25 20:44

[討論] 跑膠定電壓定電流

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +3

作者: xy234786 - 發表於 2017/10/05 13:47(6年前)

4^F→xy234786: 所以是定電流?10/05 20:05

[討論] loading control

[ Biotech ]25 留言, 推噓總分: +2

作者: xy234786 - 發表於 2017/09/29 01:20(6年前)

5^F→xy234786: 建議二抗用多少呢？10/01 19:39

6^F→xy234786: 不確定只是拿實驗室唯一的抗體來做 (實驗室沒有人在做w10/01 19:41

7^F→xy234786: estern)，沒人知道能不能hide到，我也沒有學長學弟妹@@10/01 19:41

8^F→xy234786: paper上都不太會寫control 抗體的廠商也不知道怎麼買，10/01 19:43

9^F→xy234786: 老師說要補這個control 就好了應該可以寫論文了... 只10/01 19:43

10^F→xy234786: 是卡了一個多禮拜了10/01 19:43

13^F→xy234786: 我再跑了一次膠並分別人我的目標蛋白抗體與beta-actin10/02 23:43

14^F→xy234786: 去hide10/02 23:43

15^F→xy234786: https://i.imgur.com/hTdYwy9.jpg10/02 23:44

16^F→xy234786: https://i.imgur.com/bZYopmt.jpg10/02 23:44

17^F→xy234786: 結果beta-actin還是沒有band10/02 23:44

18^F→xy234786: 我也想可是大家都蠻忙的沒人會理你的老爸又不在只好10/02 23:52

19^F→xy234786: 來這問問看10/02 23:52

20^F→xy234786: 老闆10/02 23:53

[討論] 算錯sample dye

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +2

作者: xy234786 - 發表於 2017/09/24 17:52(6年前)

3^F→xy234786: qq我load完後跑了一段時間才想起件事情這樣應該不太會09/24 21:08

4^F→xy234786: 影響吧…09/24 21:08

7^F→xy234786: 是有跑下去不過你們提到的在load sample時會浮起來嗎？09/24 23:41

8^F→xy234786: 這點是比以及有稍微覺得sample浮起來了09/24 23:41

[求救] 跑膠band彎彎的

[ Biotech ]24 留言, 推噓總分: +5

作者: xy234786 - 發表於 2017/09/14 13:59(6年前)

4^F→xy234786: 不過我有八個sample加marker，用大的齒梳，會無法避免09/15 21:45

5^F→xy234786: 用到旁邊的well09/15 21:45

8^F→xy234786: 我沒試過100V 80min transfer效果好嗎？會不會tran不過09/17 23:41

9^F→xy234786: 去09/17 23:41

10^F→xy234786: lab的冰寶是都沒有換因為也沒其他的qq 每次tran完是都09/17 23:43

11^F→xy234786: 滿燙的所以主因可能就是過熱嗎？我是都埋在冰裡tran..09/17 23:43

12^F→xy234786: .09/17 23:43

15^F→xy234786: 我的是18%膠建議用多久呢09/18 22:00

[求救] 如何更清楚分出band

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +4

作者: xy234786 - 發表於 2017/09/01 23:43(6年前)

7^F→xy234786: survivin?09/03 10:50

13^F→xy234786: https://i.imgur.com/UhrQSSn.jpg09/05 00:26

14^F→xy234786: 我翻了實驗室之前的論文，大概就要做到這樣09/05 00:27

[求救] 跑膠問題

[ Biotech ]21 留言, 推噓總分: +6

作者: xy234786 - 發表於 2017/08/28 16:23(6年前)

2^F→xy234786: http://i.imgur.com/yy87KjN.jpg08/28 18:21

3^F→xy234786: 最下面marker整個歪斜的很可怕對結果應該不會影響吧08/28 18:22

7^F→xy234786: 我sample load 12lambda,marker load 3 lambda08/28 23:31

13^F→xy234786: 這組電泳設備實驗室只有我在用，其實實驗室也只有我一08/30 22:10

14^F→xy234786: 個學生，這些設備還是我自己從雜物堆裡翻出來拼起來用08/30 22:10

15^F→xy234786: 的，所以也沒有其他人用@@08/30 22:10

[求救] commasie 染色後的蛋白lysate沒有band

[ Biotech ]33 留言, 推噓總分: +3

作者: xy234786 - 發表於 2017/07/27 23:34(6年前)

1^F→xy234786: 正常來說總蛋白lysate去跑應該要有一條條各種大小蛋白07/27 23:37

2^F→xy234786: 的band吧？我這樣是因為沒有破細胞破完全嗎？07/27 23:37

5^F→xy234786: 細胞指的是太少嗎？ lysis buffer我是照著學長給的配07/28 09:01

6^F→xy234786: 需要sonicator打破嗎？膠的部份應該沒有問題正常的配07/28 09:01

7^F→xy234786: 12%膠染色我染10分鐘後就多換幾次清水...07/28 09:01

10^F→xy234786: http://i.imgur.com/QaVF5sM.jpg07/29 10:58

11^F→xy234786: 我用我之前的純化蛋白跑在旁邊，這樣代表什麼呢07/29 10:59

17^F→xy234786: 如果是破細胞破不完全，會測的到30mg/ml這樣的濃度嗎？07/29 19:31

18^F→xy234786: 那如果這樣是不是要用sonicator再破會畢較好07/29 19:31

24^F→xy234786: 我是使用nanodrop測定，並以lysis buffer做為blank07/30 10:30

25^F→xy234786: 會不會是有可能蛋白都degrade了，斷了，但仍然測的到高07/30 10:31

26^F→xy234786: 濃度07/30 10:31

28^F→xy234786: 我也使用braford試過了確實有這樣的濃度07/30 13:43

29^F→xy234786: 我使用sonicatorhttp://i.imgur.com/Rya8ioU.jpg後的跑08/02 14:29

30^F→xy234786: 膠結果08/02 14:29

31^F→xy234786: 這樣算正常嗎？08/02 14:29

[方法] tricine gel

[ Biotech ]28 留言, 推噓總分: +4

作者: xy234786 - 發表於 2017/06/01 18:32(7年前)

8^F→xy234786: 感謝大家我試試看06/03 12:31

9^F→xy234786: http://i.imgur.com/IWMfFxT.jpg06/16 14:19

10^F→xy234786: 請問一下為什麼感覺兩個sample跑的速度不一樣然後到06/16 14:21

11^F→xy234786: 下半部的時候 marker的band也變的有點歪斜我這個膠是06/16 14:21

12^F→xy234786: 不是一層8% 第二層10% 第三層16.5%的tricine gel跑的(06/16 14:21

13^F→xy234786: 老師要我這樣做)06/16 14:21

18^F→xy234786: 我為了避免互相擠壓分開load了，但跑出的結果還是分不07/24 19:20

19^F→xy234786: 我為了避免互相擠壓分開load了，但跑出的結果還是分不07/24 19:37

20^F→xy234786: 開也，頂多就只有一條band，老師說他以前做實驗連50Da07/24 19:37

21^F→xy234786: 都分的開，我怎麼分不開@@07/24 19:37

22^F→xy234786: 老師是跟我說第一層跑10mA,第二層15mA,第三層25mA，這07/24 19:43

23^F→xy234786: 樣條件正確嗎？07/24 19:43

24^F→xy234786: 樓上t大你當初是怎麼跑的呢？，可以跟你要詳細protocol07/24 19:50

25^F→xy234786: 嗎？膠配方...http://i.imgur.com/xFTZlSX.jpg電壓電流07/24 19:50

26^F→xy234786: 時間... 緩衝液配方等等另外老闆一直說要用Horfer SE2807/24 19:50

27^F→xy234786: 0電泳設備跑才分的開你也是用這設備跑的嗎？快畢不了07/24 19:50

28^F→xy234786: 業了希望趕快跑出來07/24 19:50

[方法] T.vaginalis lysis buffer

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +1

作者: xy234786 - 發表於 2017/05/01 23:55(7年前)

2^F→xy234786: 我有找了一些文獻，跟著做，結果離心完後，應該要有pell05/05 11:33

3^F→xy234786: et跟上清液，不過發現沒有什麼pellet,上清液飄著濁濁的05/05 11:33

4^F→xy234786: 一層，這樣表示有破成功嗎？我可取上清液去做實驗嗎？05/05 11:33

8^F→xy234786: 我取上清液去測濃度有30mg/ml,這樣子正常嗎？07/25 11:34

作者查詢 / xy234786