[求救] 如何更清楚分出band

看板Biotech作者 (阿亮)時間6年前 (2017/09/01 23:43), 編輯推噓4(4推 0噓 15→)
留言19則, 9人參與, 最新討論串1/1
如圖，我想要分出21 ,19 , 22kda之蛋白，我用的條件是上膠4%膠(30V)，下膠16%(30mA) ，使用的buffer有分陰陽極，因為參考一篇paper tricine gel的配方去跑的，跑的有點 醜，只看到兩條，若想看到第三條，可以怎麼改良呢？ http://i.imgur.com/8OpBddN.jpg
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09/01 23:57, , 1F
更高的%
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更低的A/V，略低的蛋白質濃度，well的大小
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推
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用低溫去跑 設備允許可以試試用更長的膠跑
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09/02 23:38, , 4F
這圖完全不像16% protein ladder該有的樣子,這gel不是沒跑
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開到底,就是配製有誤或非鮮配;可以google survivin圖參考
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前面#1PUWW0Kx提到用12%跑,還比這篇的ladder拉得更開
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survivin?
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樓樓上在說啥?
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isotype吧
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推
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真的是survivin，是一種抗凋亡蛋白質(是說名字就很
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有這種感覺了)
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大小剛好是本文提到的，所以應該有很高的參考價值
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我翻了實驗室之前的論文，大概就要做到這樣
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雖然本文是問怎麼把band跑開，但看到之前的data，我建議
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不要用SDS-PAGE，這三個多肽太接近了。跑個液相層析之後
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送去打mass比較好。
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推
09/10 23:56, , 18F
推薦用12% Bis-Tris 的預製膠搭配 MOPS buffer。
09/10 23:56, 18F
推
09/18 21:08, , 19F
16或20%膠試試 然後設60-80V慢慢跑看看
09/18 21:08, 19F
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