[求救] 跑膠band彎彎的

看板Biotech作者 (阿亮)時間6年前 (2017/09/14 13:59), 編輯推噓5(5推 0噓 19→)
留言24則, 8人參與, 最新討論串1/1
https://i.imgur.com/XxZYzHY.jpg
這是我western圖，不知道為何有些band會歪掉，不是一條直線，是跟跑膠時的電壓有關 嗎？我是上膠60V，下膠100V在跑，transfer200V一個小時。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.8.211.89 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1505368782.A.2D0.html
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09/15 12:17, , 1F
跑的時候裡面可能有漏buffer?
09/15 12:17, 1F
推
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左右是不是有空一格well沒有load東西？這樣很容易沒有平
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09/15 15:51, , 3F
衡band歪掉
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09/15 21:45, , 4F
不過我有八個sample加marker，用大的齒梳，會無法避免
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用到旁邊的well
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推
09/15 23:16, , 6F
下面膠感覺融了 transfer100v80分鐘試試
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推
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冰寶有換嗎？
09/16 23:12, 7F
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09/17 23:41, , 8F
我沒試過100V 80min transfer效果好嗎？ 會不會tran不過
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去
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lab的冰寶是都沒有換 因為也沒其他的qq 每次tran完是都
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滿燙的 所以主因可能就是過熱嗎？ 我是都埋在冰裡tran..
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.
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推
09/18 03:08, , 13F
這麼小不會過不去的，我們都用94V而已，100kDa也是
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1h就過(10% gel)，高趴數的膠要久一點。
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我的是18%膠 建議用多久呢
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sample夠用的話，而你又想跑漂亮，給你一些自己troublesh
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oot的方法。同時跑兩片膠，跑完之後看ladder有沒有跑好看
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，選一片好的做WB，另一片染CBR相互對照。有懷疑步驟中的
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細節就一次改一個條件去抓。另外，transfer buffer不要。
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reuse，不然只會越跑越慢、越跑越燙。
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順帶一提，你transfer的電壓不太可能上得去200V，如果硬
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09/19 07:30, , 22F
催上去，膠應該也融化了吧
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推
09/05 22:35, , 23F
溫度太高也有可能 我們會埋在冰裡面再拿去4度冰箱
09/05 22:35, 23F
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09/05 22:35, , 24F
裡面跑 我們機器統一是在4度裡面
09/05 22:35, 24F
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