[討論] loading control

看板Biotech作者 (阿亮)時間6年前 (2017/09/29 01:20), 編輯推噓2(2推 0噓 23→)
留言25則, 4人參與, 6年前最新討論串1/1
我使用這家的beta-actin做為loading controlhttps://www.scbt.com/scbt/product/bet a-actin-antibody-c4 第一次嘗試去針對陰道鞭毛蟲做western，跟據上面 說明書的比例分別以1比200,1比500,1比1000去hide 結果如下 https://i.imgur.com/Ji9j2HF.jpg
出來這樣很醜的結果，我想請問可能是選錯loading control嗎？又或是比例上的錯誤導 致這樣的結果? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 115.82.145.199 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1506619238.A.446.html
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09/29 04:40, 6年前 , 1F
marker也呈色嗎？二抗太濃？
09/29 04:40, 1F
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09/29 05:01, 6年前 , 2F
不覺得是二抗耶 那個lane外面都滿乾淨的 可能是PAGE
09/29 05:01, 2F
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09/29 05:01, 6年前 , 3F
本來就跑很糟XDDD
09/29 05:01, 3F
推
09/30 06:34, 6年前 , 4F
你確定這個ab有認陰道鞭毛蟲的actin嗎
09/30 06:34, 4F
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10/01 19:39, 6年前 , 5F
建議二抗用多少呢？
10/01 19:39, 5F
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10/01 19:41, 6年前 , 6F
不確定 只是拿實驗室唯一的抗體來做 (實驗室沒有人在做w
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10/01 19:41, 6年前 , 7F
estern)，沒人知道能不能hide到，我也沒有學長學弟妹@@
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10/01 19:43, 6年前 , 8F
paper上都不太會寫control 抗體的廠商 也不知道怎麼買，
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10/01 19:43, 6年前 , 9F
老師說要補這個control 就好了 應該可以寫論文了... 只
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是卡了一個多禮拜了
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10/01 19:56, 6年前 , 11F
良心建議 去找一個專門做蛋白質的lab請他們順手幫你跑
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10/01 19:56, 6年前 , 12F
一張膠
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10/02 23:43, 6年前 , 13F
我再跑了一次膠 並分別人我的目標蛋白抗體與beta-actin
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10/02 23:43, 6年前 , 14F
去hide
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10/02 23:44, 6年前 , 17F
結果beta-actin還是沒有band
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10/02 23:52, 6年前 , 18F
我也想 可是大家都蠻忙的 沒人會理你的 老爸又不在 只好
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10/02 23:52, 6年前 , 19F
來這問問看
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10/02 23:53, 6年前 , 20F
老闆
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10/03 01:59, 6年前 , 21F
可以printscreen,再加上一些標示，只看上面那張還以為你
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10/03 01:59, 6年前 , 22F
成功了
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10/03 02:00, 6年前 , 23F
改了什麼條件嗎，只是重跑不可能從很髒變成沒有band啊
10/03 02:00, 23F
推
10/03 04:09, 6年前 , 24F
actin是幾乎零失敗率的 我覺得不是跑膠的問題 你可以考慮
10/03 04:09, 24F
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10/03 04:09, 6年前 , 25F
染ponceau 這也是很普遍的loading control
10/03 04:09, 25F
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