作者查詢 / match308

總覽項目：發文 | 留言 | 暱稱

作者 match308 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共29則

限定看板：Biotech

首頁

尾頁

[求救] 我的PCR有Negative control的問題?

[ Biotech ]26 留言, 推噓總分: +8

作者: kutoushinji - 發表於 2010/11/22 05:08(15年前)

1^F推match308:以前有沒有人做過類似的sample呢有的話可能是從舊sample11/22 05:22

2^F→match308:還在環境中造成的contamination,試看看去其他bench操作11/22 05:23

3^F→match308:完全隔絕你現在用的東西,置於實驗的不一致,可能跟每次11/22 05:24

4^F→match308:contamination多少和primers bind到contaminants上的狀況11/22 05:26

5^F→match308:不同而異吧11/22 05:26

[討論] 有關E.coli是否會踢掉plasmid的問題

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +2

作者: McRay - 發表於 2010/08/13 21:51(15年前)

7^F→match308:踢掉plasmid的細菌不就長不起來了嗎,長得起來就只剩有的08/14 13:21

Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +1

作者: boblu - 發表於 2010/08/12 00:24(15年前)

1^F→match308:final volume最好有50uL給enzyme足夠空間反應,這樣量的RE08/12 11:13

2^F→match308:差不多了,vector量看個人喜好吧,CIP treat完要inactivate08/12 11:18

Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +2

作者: boblu - 發表於 2010/08/11 09:49(15年前)

1^F→match308:我都放超量切overnight,如果你要切的兩個site很近的話08/11 10:09

2^F→match308:enzymes互相干擾會比較難切~08/11 10:10

Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: 0

作者: boblu - 發表於 2010/08/10 03:45(15年前)

1^F→match308:你不分別做single digestion嗎只切一刀能解釋為什麼V+I08/10 07:25

2^F→match308:長比較少,因為只有一邊黏起來,另一邊黏不起來,所以有08/10 07:26

3^F→match308:vector and insert ligation的反而沒辦法form colony08/10 07:27

4^F→match308:做2.如果vector已經去P了,就算只切一刀跟切兩刀會差不多08/10 07:33

9^F→match308:沒甚麼必要,那就等2的結果吧08/10 11:16

10^F→match308:我覺得有沒有酒精不是重點08/10 11:17

[求救] cloning實驗做到digest gelpurificatio …

[ Biotech ]45 留言, 推噓總分: +4

作者: honeytea96 - 發表於 2010/08/08 00:58(15年前)

1^F→match308:your album is private, not publicly accessible08/08 03:01

5^F→match308:為什麼gel extraction之後還要再跑一次gel呢?不就切你要08/08 21:09

6^F→match308:的band,做完gel extraction就可以拿去digest了嗎08/08 21:10

10^F→match308:嗯,我的意思是你第一次gel purification之後,拿到DAN就可08/09 00:15

11^F→match308:以拿去切了,你只cut right band的話大部分DNA都會是好的08/09 00:17

12^F→match308:不需要在做一次purification,每做一次conc就少一半08/09 00:18

13^F→match308:不太懂為什麼每次你的purification後還要跑膠,那跑膠後08/09 01:24

14^F→match308:DNA又要怎麼extract?08/09 01:24

27^F推match308:大概懂你怎麼做的了,第二張圖顯示你PCR purification kit08/09 02:29

28^F→match308:也沒辦法把primers濾掉,不如就全部直接load做gel purify08/09 02:30

32^F→match308:=>digestion=>gel purify=>ligation,我沒做過切完後不純08/09 02:33

34^F→match308:化的,可能可行但至少要heat inactivate吧08/09 02:34

[求救] Vector only 的 control 比 vector + i …

[ Biotech ]55 留言, 推噓總分: +12

作者: boblu - 發表於 2010/08/06 22:34(15年前)

28^F→match308:如果做法都沒錯的話,建議你換個ligation kit吧,推薦roche08/08 04:45

首頁

尾頁