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作者 iris416 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共69則

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[轉錄][請問] 抽人血的PBMC

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +3

作者: leoblack - 發表於 2011/03/11 15:47(13年前)

4^F推iris416:白白的那一層~ 上到下依次是血漿>>PBMC>>ficoll>>RBC03/12 16:41

[討論] 大家都怎麼知道某藥物該溶於什麼溶液?

[ Biotech ]21 留言, 推噓總分: +8

作者: orfan - 發表於 2011/03/09 10:15(13年前)

10^F推iris416:以前lab都用DMSO~可是還是要看你是什麼藥吧03/09 16:20

[求救] 用TRIZOL抽RNA

[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +11

作者: bagagirl - 發表於 2010/09/15 14:52(13年前)

4^F推iris416:我也曾經這樣!!但我不是medium的問題~因為我是直接從血球09/15 18:51

5^F→iris416:抽細胞出來用TRIzol抽RNA...也曾經這樣~~後來發現是我加09/15 18:51

6^F→iris416:chloform之後沒有"劇烈"的vortex...要很強烈的vortex10秒09/15 18:52

7^F→iris416:左右...因為chloform是有機溶劑會讓整管分層...你要先打亂09/15 18:53

8^F→iris416:分層的界線再使用離心的方式...離完心才會得到清澈水層09/15 18:54

9^F→iris416:推測那粉紅色就是沒有離下去的protein(蛋白質要在最下層)09/15 18:55

10^F→iris416:這樣你的RNA很容易會不純09/15 18:55

18^F推iris416:我之前因為怕RNA斷掉所以不敢vortex太用力..結果離心好幾09/16 23:32

19^F→iris416:次...後來看學姊做才知道原來要暴力一點對它XD 雖然我一直09/16 23:33

20^F→iris416:心裡有個疑問這樣RNA難道不會斷嗎..>"<09/16 23:33

[討論] 配SDS-PAGE用的buffer產生結晶

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +8

作者: kingtiger - 發表於 2010/05/25 16:43(14年前)

2^F推iris416:我也碰過這種情形!!!!! 其實還是可以用的(我用過了)05/25 17:05

3^F→iris416:看你敢不敢而已如果data很重要的話就重泡吧05/25 17:06

6^F推iris416:推樓上!! NaOH可能也是原因之一...05/25 17:08

7^F→iris416:其實硬著頭皮做是下下策啦應該要重新配過比較好..05/25 17:10

[求救] PCR的問題???

[ Biotech ]26 留言, 推噓總分: +11

作者: iris416 - 發表於 2009/12/23 18:38(14年前)

2^F→iris416:對!!有時候超奇怪的~ 隨意做反而有東西~真正小心的時候12/23 18:45

3^F→iris416:卻空空如也!! 或許這幾天我心情都滿緊繃的吧12/23 18:46

6^F→iris416:有~我有把第一次P出來的檢體再拿出來當PTC 一起P一次~12/23 19:16

7^F→iris416:結果跟第一次結果不一樣,出現了很多雜band,不知為什麼12/23 19:16

9^F→iris416:恩,不過也想知道是哪邊出了問題, 這個實在是很神奇12/23 20:21

11^F→iris416:恩~我想去拜拜XDD 然後再討論該怎麼修改實驗的條件...12/23 21:11

16^F→iris416:恩...我會換一批...休息個一天再重新出發!!被PCR弄到很煩12/24 17:53

17^F→iris416:可是a大,降低溫度的話不是會出現更多的雜band嗎??12/24 18:02

18^F→iris416:我的預期結果只有primer dimer出現最好不要有任何的雜band12/24 18:03

22^F→iris416:謝謝大家的回答~~討論的結果是可能要重新設primer了12/25 16:19

26^F→iris416:很奇怪阿有時候條件都一樣但都無法重現條件都要重設01/06 16:38

[求救] 關於western blot訂kit

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +2

作者: iris416 - 發表於 2009/10/30 00:51(14年前)

1^F→iris416:噢~我們實驗室的western系統是要重新建立的~...因為之前沒10/30 00:56

2^F→iris416:有~不知道大家推哪一家廠商?10/30 00:56

[求救] 有關SYBR Green Master Mix~

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +3

作者: iris416 - 發表於 2009/10/20 20:18(14年前)

3^F→iris416:那如果我拿出來差不多一分鐘分裝一管這樣有影響嗎??10/21 00:01

7^F→iris416:影響是指完全無法work還是多多少少會work一點呢?10/21 12:22

11^F→iris416:冰在冰箱是沒有開燈啦~而且那組kit是用小鋁罐裝著的~10/22 18:02

12^F→iris416:但是從小鋁罐裡退冰以後再拿出來分裝,分裝的期間沒包鋁箔10/22 18:03

13^F→iris416:其實我們家學長也說沒差...但可能我第一次裝有點神經質吧~10/22 18:04

14^F→iris416:很怕曝光一下就不能用...害到實驗室其他學長姐就不好了~10/22 18:05

[求救] Real-Time PCR 結果不穩定

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +4

作者: nexusfantasy - 發表於 2009/09/04 01:02(14年前)

1^F推iris416:我也想問這個問題~但是我學姐告訴我體積ㄧ定要準~我做二09/04 16:36

2^F→iris416:重複,只要pipetteman跑掉一點點~就會差很多...09/04 16:37

3^F→iris416:產生氣泡應該還好, 按到第二段以後沿著管壁拉上來~09/04 16:38

[求救] DEPC水該換過嗎

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +1

作者: iris416 - 發表於 2009/09/02 16:31(14年前)

5^F→iris416:恩..是阿~一直找不到真正的汙染源~畢竟污染真的很多可能09/02 23:27

[求救] DNA難溶~!

[ Biotech ]38 留言, 推噓總分: +10

作者: iris416 - 發表於 2009/08/11 21:53(15年前)

2^F→iris416:是DNA~因為TRIzol可以抽DNA跟RNA~這次我要的是DNA08/11 22:01

3^F→iris416:RNA也一起抽了~但是有溶完全~而且也不是馬上要做08/11 22:02

5^F→iris416:沒有耶~因為照著protocal已經加了NaOH~因為學姊已經做完了08/11 23:16

6^F→iris416:沒有什麼問題...改TE BUFFER真的會比較好嗎??08/11 23:18

7^F→iris416:如果真的有必要再加TE 下去~該加多少比較好?08/11 23:20

12^F→iris416:水浴或加熱可以加多久呢??因為我今天已經放56度30min了08/12 00:12

13^F→iris416:加熱太久是不是不好呀? 怕DNA壞掉之類的08/12 00:13

17^F→iris416:恩恩~但是那層霧霧的測出來濃度3000多~難道不會是DNA嗎?08/12 00:40

18^F→iris416:protocal我有~但是我怕不小心就把DNA去掉~不過還是謝謝!!08/12 00:42

27^F→iris416:有出現在280~今天重測也是兩個peak在230及280那~A260/28008/12 14:56

28^F→iris416:為1.3~1.8左右~不知道怎麼每次測出來都會不太一樣...濃度08/12 14:57

29^F→iris416:從70~100多都有..(同一管)雖然這樣但還是先拿去做long-PCR08/12 14:58

30^F→iris416:跟Real-time了~不知道做不做得出來~現在只能試試看!08/12 14:59

31^F→iris416:根據我家助理說的~他絕得有可能有混雜protein~08/12 14:59

32^F→iris416:謝謝熱心的大大回答~只能等PCR跑完再說了..希望不會白做工08/12 15:01

36^F→iris416:是cell的~不過問題已經解決了^^溶不掉的是protein跟雜質08/18 23:52

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