[討論] 配SDS-PAGE用的buffer產生結晶

看板Biotech作者 (~（⊙ｏ⊙）~)時間14年前 (2010/05/25 16:43), 編輯推噓8(8推 0噓 8→)
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我配的是1.5M Tris-HCl 500ml + 10% SDS 20 ml,補水補到1L 做為下層膠的buffer 但在室溫下放置一天後產生了結晶物(白色細針狀) 且試過再加一倍體積的水也是無法溶解之 想請問是什麼出了問題,我是用血清瓶裝的 一開始以為是因為過飽和而造成的鹽析作用 但是昨天剛配好1.5M Tris-HCl並補水後再加SDS並沒有出現結晶 而是到今天才出現的 想問看看是何原因,有沒有解決的方法 我的Tris-HCl是用JTBaker的,以水溶解後再以10N NaOH調至pH=8.8 -- . ′人生五十一睡夢 .＊ * ◢ ◢◣︿◢◣ . ＊* 一期榮華一杯酒 *′. ◤◣ ◤︺◥ ◢ ▁▁ ◤◣μ◢◥ - 上杉謙信(1530~1578) - ※ ◣◢︸◣◢◤◣ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.29
推
05/25 17:02, , 1F
tris-hcl不是先用tris泡好再用Hcl下去滴嗎@@?
05/25 17:02, 1F
推
05/25 17:05, , 2F
我也碰過這種情形!!!!! 其實還是可以用的(我用過了)
05/25 17:05, 2F
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05/25 17:06, , 3F
看你敢不敢而已 如果data很重要的話就重泡吧
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05/25 17:06, , 4F
確實,用NaOH似乎會增加Na+離子於溶液中......
05/25 17:06, 4F
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05/25 17:07, , 5F
回應二樓,我也做了,只是膠凝固的速度不一致
05/25 17:07, 5F
推
05/25 17:08, , 6F
推樓上!! NaOH可能也是原因之一...
05/25 17:08, 6F
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05/25 17:10, , 7F
其實硬著頭皮做是下下策啦 應該要重新配過比較好..
05/25 17:10, 7F
推
05/25 23:32, , 8F
校正完ph值以後，過0.45的濾膜吧!大多數時候是因為bufer
05/25 23:32, 8F
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05/25 23:33, , 9F
裡面殘存著沒有溶解完全的晶體顆粒，所形成的結晶
05/25 23:33, 9F
推
05/26 01:09, , 10F
SDS可以過膜嗎?
05/26 01:09, 10F
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05/26 15:36, , 11F
Tris-HCl不要跟SDS先混在一起,至於4度冰箱存放
05/26 15:36, 11F
推
05/27 01:49, , 12F
可以過阿~
05/27 01:49, 12F
推
05/29 19:49, , 13F
要看 pH值阿 如果你要 pH 高的那要用Tris base
05/29 19:49, 13F
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05/29 19:51, , 14F
再用 HCl 滴定 如果你直接用 Tris-HCl powder 那 pH
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05/29 19:51, , 15F
大約會是 3.* 然後要用 NaOH 低很多很多 就會太多鹽
05/29 19:51, 15F
推
05/30 12:20, , 16F
推樓上!!
05/30 12:20, 16F
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