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作者 bobbygau 在 PTT 全部看板的留言(推文), 共22則

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[求救] AT-rich PCR 無產物

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +1

作者: blueashin - 發表於 2010/01/19 18:45(16年前)

5^F→bobbygau:最近也是在做一段AT-rich基因的擴增，一直P不出來，直到01/21 23:59

6^F→bobbygau:試了瑞林生技代理的KAPA HIFI，超讚，他們有試用品。01/22 00:02

[求救] EMSA的supershift

[ Biotech ]1 留言, 推噓總分: 0

作者: pinkcycle - 發表於 2009/09/14 20:24(16年前)

1^F→bobbygau:有圖有真相09/15 12:55

[求救] 如果你在NEBcutter找的酵素切點...

[ Biotech ]1 留言, 推噓總分: 0

作者: tenyu - 發表於 2009/08/26 15:35(16年前)

1^F→bobbygau:you are right!08/26 23:27

[求救] Western有很多 non-specific 的bands

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +2

作者: Loofah1008 - 發表於 2009/08/03 13:37(16年前)

4^F→bobbygau:應該把完整protocol寫出來，比較好抓問題。如果你連actin08/03 16:40

5^F→bobbygau:都這麼髒，技術要再練練哦。確定抗體能用嗎?08/03 16:42

Re: [求救] DNA電泳

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +1

作者: yashi - 發表於 2009/07/22 11:51(16年前)

1^F→bobbygau:用來用去還是覺得EtBr便宜好用穩定又漂亮，坊間非EtBr染07/22 13:12

2^F→bobbygau:劑雖訴求安全性及靈敏性，但對小片段染色效果均不佳，你07/22 13:14

3^F→bobbygau:可以自己比較看看。我建議的你都可以試試，反正作很快啊07/22 13:16

Re: [求救] DNA電泳

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +1

作者: yashi - 發表於 2009/07/22 00:08(16年前)

5^F→bobbygau:經過Melting curve後，dsDNA全被打開，很短時間內降溫，07/22 11:06

6^F→bobbygau:常常會亂黏而造成smear。我覺得可以不用跑膠了，不然就07/22 11:08

7^F→bobbygau:別做melting curve。SYBR Safe/Green染小片段效果不佳，07/22 11:09

8^F→bobbygau:試試EtBr。07/22 11:10

[求救] DNA電泳

[ Biotech ]33 留言, 推噓總分: +7

作者: yashi - 發表於 2009/07/20 10:29(16年前)

19^F→bobbygau:real-time PCR是SYBR Green嗎?有跑Melting curve?同一對07/20 23:33

20^F→bobbygau:primers?確定有產物嗎?看看之前的反應跟現在的反應有哪07/20 23:35

21^F→bobbygau:些地方不同也許就能釐清問題，有時候全部reagents換新也07/20 23:37

22^F→bobbygau:可能改善，不然就去拜拜吧。07/20 23:38

[求救] gel extraction 出雜band

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +2

作者: gigabytetech - 發表於 2009/06/29 00:24(16年前)

5^F→bobbygau:應該是conformation改變所致，影響後續實驗不大06/29 15:04

[方法] 保存細胞在-80C冰箱

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +7

作者: bobbygau - 發表於 2009/05/26 16:31(16年前)

3^F→bobbygau:原因不明，只記得廣告上這麼說的。05/26 23:02

[求救] lentivirus production

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +3

作者: ymme - 發表於 2009/02/20 00:37(17年前)

5^F推bobbygau:我是用QIAGEN midi,結果還好。plasmid conformation才是02/26 16:22

6^F→bobbygau:影響transfection效率的主因。另請確認Lipo與DNA的ratio02/26 16:24

7^F→bobbygau:1:1似乎太低了，試試用Lipo2000:DNA=3:102/26 16:27

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