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作者 bluecsky 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共687則

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[求救] 客製化單株抗體的預算??

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +3

作者: infinityrain - 發表於 2007/11/28 00:31(16年前)

1^F推bluecsky:我比較想知道你老闆給你多少預算做這個..XD11/28 20:46

Re: [求救] transformation的問題

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +6

作者: wangba - 發表於 2007/11/19 14:18(16年前)

4^F推bluecsky:應該說blunt end比較需要CIP處理一下11/19 20:07

5^F→bluecsky:CIP是去掉5'的磷酸..避免兩個blunt end成self-ligation11/19 20:07

6^F→bluecsky:sticky end不是不能用..而是不需要..11/19 20:09

7^F→bluecsky:因為兩個都是stick end的話是無法self-ligation的11/19 20:09

9^F推bluecsky:哈..感謝樓上幫我補正11/20 08:03

Re: [問題] 關於western blotting的呈色

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +5

作者: mournermind - 發表於 2007/11/07 02:29(16年前)

1^F推bluecsky:壓片是能夠一次壓好幾張沒錯..不過顏色應該都一樣11/07 09:15

2^F→bluecsky:應該只有黑色而已吧..壓不同抗體應該是說11/07 09:16

3^F→bluecsky:一張底片能夠壓好幾張membrane..11/07 09:17

4^F→bluecsky:AP的顏色比較漂亮啦..壓片的靈敏度比較高吧11/07 09:17

5^F→bluecsky:壓的時間拉長可以讓一些不明顯的也顯示出來11/07 09:18

[問題] 在網路上看見一篇文章　請高手鑒定

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +6

作者: daretosay - 發表於 2007/11/03 03:31(16年前)

6^F推bluecsky:喝水都可以死人了XD11/03 15:39

Re: [求救] 實驗的一些設計

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +3

作者: leondemon - 發表於 2007/11/03 00:51(16年前)

5^F推bluecsky:其實多看別人呈現的data都會有這些吧XD11/03 10:22

[求救] 期刊的唸法

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +6

作者: hughzero - 發表於 2007/11/01 19:27(16年前)

1^F推bluecsky:STAT1我還是會念S-T-A-T-ONE耶.11/01 19:29

Re: [求救] western的問題

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +1

作者: boblu. - 發表於 2007/10/29 03:05(16年前)

1^F推bluecsky:感謝..問題已解決..因為我跑的SAMPLE中就有overexpress10/29 19:27

2^F→bluecsky:給老師看的結果是一樣認不到(我同時有跑mutant跟WT)10/29 19:27

3^F→bluecsky:所以是抗體根本不能用..因為這是我第一次用非comercial10/29 19:27

4^F→bluecsky:的anti-body..所以跑出很多bnad心裡很慌亂..10/29 19:28

[求救] semi-dry transfer後protein糊掉(western)

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +5

作者: tinapig - 發表於 2007/10/16 16:51(16年前)

4^F推bluecsky:氣泡應該是會transfer不完全..糊掉我想應該是過熱10/17 01:44

5^F→bluecsky:BUFFER都先冰等要跑再拿出來..然後把電泳槽埋在冰裡跑10/17 01:45

6^F→bluecsky:或是把電泳槽拿去冰箱跑也可以..在不然10/17 01:45

7^F→bluecsky:就用低電壓跑久一點..我看過有人是放冷房用10V跑隔夜的10/17 01:46

[問題] protein marker以及SDS-PAGE的band

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +4

作者: bluecsky - 發表於 2007/10/07 15:47(16年前)

5^F推bluecsky:所以一般軟體算的原來是denature的阿10/07 16:01

6^F→bluecsky:原來如此..我沒考慮到修飾的問題10/07 16:03

[求救] 有關蛋白質純化..

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +5

作者: bluecsky - 發表於 2007/09/16 20:00(16年前)

2^F→bluecsky:沒有抗體怎麼做western...囧09/16 20:18

3^F→bluecsky:還是R大的意思是說抓his-tag的抗體?..有這種東西嗎?09/16 20:19

5^F推bluecsky:原來如此阿..那去找找有沒有相對應的anti-body..09/16 20:21

7^F→bluecsky:了解..不然這樣盲目的搞下去也不知道何時能了..= =09/16 20:23

8^F→bluecsky:不過我的目標protein是一個transmembrane protein..09/16 20:24

9^F→bluecsky:會比較難以誘導或是純化嗎?09/16 20:24

13^F推bluecsky:跟據QIAGEN的手冊配的..lysis buffer中有10mM的imidazole09/19 00:36

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