Re: [問題] 關於western blotting的呈色

看板Biotech作者 (阿矇)時間18年前 (2007/11/07 02:29), 編輯推噓5(5推 0噓 4→)
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※ 引述《LIENkt (蓮讞)》之銘言： : 想請教大家 : 在western blotting最後的呈色中 : 我知道的有ECL呈色還有HRP跟AP : 它們之間的差異是什麼？ : 為什麼有些是要壓底片有些是直接呈色？ : 謝謝 我們實驗室是用AP...我印象中AP的原理是用2抗上的一個kinase(忘了是啥) 將BCIP 跟NTP中的某個東西加上磷酸根後形成formazon後沉澱呈色 (molecular cloning中很詳細)壓底片的好處是可以一壓再壓而且可以壓不同抗體 還是不同顏色的樣子(不好意思只聽過沒做過... ...)不過我聽學長姐說... AP呈色比壓片明顯及漂亮多了:) 希望有幫助 囧rz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.55.220
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壓片是能夠一次壓好幾張沒錯..不過顏色應該都一樣
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應該只有黑色而已吧..壓不同抗體應該是說
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一張底片能夠壓好幾張membrane..
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AP的顏色比較漂亮啦..壓片的靈敏度比較高吧
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壓的時間拉長可以讓一些不明顯的也顯示出來
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壓片的話膜可以strip重複壓不同的抗體..各有優缺點
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=_= AP就是alkaline phosphatase 不是kinase
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壓片靈敏度較高，可以拉長時間壓。AP也有能冷光呈色的受質
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11/07 17:55, , 9F
對啦是alkaline phosphatase 把磷丟到substract上..
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文章代碼(AID): #17CBAM7C (Biotech)
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