[求救] DNA電泳

看板Biotech作者 (j31yo20)時間11年前 (2013/08/28 09:26), 編輯推噓7(7推 0噓 7→)
留言14則, 8人參與, 最新討論串10/10 (看更多)
請問我把用RE作用完的plasmid DNA 拿去跑電泳，我設計要拿294bp的片段，但是照膠完發現小片段的band沒有很亮，大片段的很亮，是不是片段越小就越暗呢？小弟是用內染劑，DNA片段越小，嵌入的越少，所以比較暗？ -- Sent from my Android -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 49.219.124.187
推
08/28 09:37, , 1F
當然。
08/28 09:37, 1F
→
08/28 10:14, , 2F
你最後那句沒錯~
08/28 10:14, 2F
推
08/28 17:21, , 3F
內染(預先加)跟外加(要用再加)不是只有差在保存期限喔?
08/28 17:21, 3F
推
08/28 17:25, , 4F
你用plasmid切 所以backbone和切下來的fragment的量是一樣
08/28 17:25, 4F
→
08/28 17:25, , 5F
的 然後因為你最後說的原因 所以小片段看起來會比較暗
08/28 17:25, 5F
→
08/28 18:25, , 6F
不論內染外染~本來就是片段越小嵌入越少,亮度越暗
08/28 18:25, 6F
→
08/28 18:25, , 7F
不過有paper證實過~外染比內染更靈敏~
08/28 18:25, 7F
→
08/29 09:16, , 8F
老板會怕EtBr 哈
08/29 09:16, 8F
→
08/29 12:49, , 9F
其實 EtBr沒有那麼毒啦..我認識有人空手摸EtBR的也好好的
08/29 12:49, 9F
推
08/29 18:27, , 10F
推樓上~如果EtBr毒~那算起來所有會相嵌入DNA的染劑都毒
08/29 18:27, 10F
推
08/29 19:54, , 11F
SYBR Green: 我會發光喔~~ *o*
08/29 19:54, 11F
推
08/30 01:42, , 12F
毒不毒除了會嵌入DNA外,還要看它能不能進到核內來決定
08/30 01:42, 12F
推
08/30 01:46, , 13F
另外SYBR Green也是mutagenic,只能說做實驗還是要注意
08/30 01:46, 13F
→
08/30 10:44, , 14F
感謝!
08/30 10:44, 14F
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