[求救] DNA電泳

看板Biotech作者 (星劍奇俠)時間15年前 (2009/05/01 14:01), 編輯推噓1(106)
留言7則, 3人參與, 最新討論串3/10 (看更多)
各位前輩好 這是我最近萃取出植物的genomic DNA 但電泳老是無法順利跑下去成BAND 以下是我實驗的照片 http://cid-24c1add12062ce49.skydrive.live.com/self.aspx/%e6%96%b0%e7%9b%b8%e7% b0%bf/UVP00022.TIF 左邊過來依序是原始樣品因為無法跑下來這次加一倍的TE去溶 第二個是用100%酒精沉澱後加TE回溶 第三個是用100%酒精沉澱後再用70%酒精WASH最後TE回溶 第四個是先用isopropanol沉澱後用70%酒精WASH最後TE回溶 但這四種處理都無法順利跑下去成BAND 想請問各位前輩有什麼方法能解決這樣的問題 感覺跑電泳時樣本仍然很黏 WELL都有被破壞出一個小洞的感覺 這DNA電泳的膠是用0.75%的 此外拿原始萃取出的樣品1ul去跑PCR也跑不出來 是否和這情形有關呢 還是DNA已經被破壞了 煩請各位前輩告知 這是一個重要的實驗結果 請大家提供意見 非常感謝您 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.96.147 ※ 編輯: robby1025 來自: 140.114.96.147 (05/01 14:13) ※ 編輯: robby1025 來自: 140.114.96.147 (05/01 14:27)

05/01 14:29, , 1F
你的DNA都在WELL裡面沒有跑下來
05/01 14:29, 1F

05/01 14:52, , 2F
建議你取少量sample稀釋再去跑膠,然後TE有EDTA會抑制PCR
05/01 14:52, 2F

05/01 14:53, , 3F
的polymerase,可以將TE的E減為1/10。
05/01 14:53, 3F

05/01 15:02, , 4F
然後genomic DNA很大,只會跑下well一點點而已~不用擔心!
05/01 15:02, 4F

05/01 15:03, , 5F
妳的問題是loading體積有點小,導致有表面張力而跑成笑臉~
05/01 15:03, 5F

05/01 15:05, , 6F
感謝上面的前輩我會試看看
05/01 15:05, 6F

05/01 15:06, , 7F
把3kb以下的marker跑掉會漂亮一點~
05/01 15:06, 7F
文章代碼(AID): #19-f0y6Q (Biotech)
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