Re: [求救] colony PCR有P到 但定序無結果
※ 引述《MrCAKE (Keep Working)》之銘言：
: ※ 引述《jazzdevil (Joyce)》之銘言：
: : 對啊,通常我們都直接抽質體 用不同enzyme去多重check..
: : 就不會有這種問題 用pcr總是偶爾會有一些假性的clone出現
: 這其實並沒有一定的道理
: enzyme digestion比較準確
: 但colony PCR也有他的好處在
: 畢竟前者要先抽plasmid而且還必須要有合適的限制脢可用
: 決定要用哪個方法前也可以稍微計算一下成本的問題
colony pcr 比較快可以知道結果
但是電泳跑膠看到的band 必須要是很明顯粗粗的
才代表這個菌比較有可能真的帶有你要的insert在裡面
因為pcr放大效果很明顯
所以有時會放大到未進入菌體的片段
也就是你會看到有p出band來
但實際上是沒挑到的
每個實驗室習慣都不同
有的養菌抽mini用enzyme來確定 是真的比較準
但是會比PCR要花多點時間才能知道結果
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