作者 silverberry 在 PTT 全部看板的留言(推文), 共918則

[討論] 關於細胞Total DNA 萃取的問題

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +1

作者: goodday06 - 發表於 2014/10/25 13:24(9年前)

6^F→silverberry: QIAGEN 的 DNeasy 抽出來主要是 30 kb, 但 up to 5010/29 04:35

7^F→silverberry: kb, 一般分析都可以用，如果要 > 50 kb 就要另外挑10/29 04:36

8^F→silverberry: kit 或是 ethanol (isopropanol) 沉澱小心抽了10/29 04:37

[求救] Gateway cloning

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: 0

作者: silverberry - 發表於 2014/10/05 01:35(9年前)

4^F→silverberry: 感謝樓上兩位~10/05 08:25

5^F→silverberry: 另外請問，如果我的 insert 是 pENTR 的兩倍大，10/05 08:26

6^F→silverberry: 我還是用他建議的 insert:vector = 0.5-2:1 嗎?10/05 08:26

7^F→silverberry: 還是應該反過來?10/05 08:27

10^F→silverberry: 喔不好意思，我沒說清楚，我是手冊上寫 molar ratio10/05 22:30

11^F→silverberry: b 大真是一語驚醒夢中人~10/05 22:31

12^F→silverberry: 不過因為 pENTR 我都加 1 uL，所以是調整 i 的量10/05 22:31

13^F→silverberry: 所以沒想清楚 @ @10/05 22:31

[求救] Lentivirus titer 測定

[ Biotech ]22 留言, 推噓總分: +3

作者: silverberry - 發表於 2014/07/19 15:38(9年前)

6^F→silverberry:感謝樓上，所以如果 vector 沒有 GFP 就要自己做一個07/21 00:54

7^F→silverberry:來當 titer 測定的依據的意思?07/21 00:55

8^F→silverberry:感謝大家的建議07/21 00:55

18^F→silverberry:謝謝大家的建議。比較完 Kit 和 ELISA 以後，發現07/25 12:08

19^F→silverberry:價格都不太和藹可親。GFP 的部分要跟其他同學討論一下07/25 12:09

20^F→silverberry:目前可能會先參考 paper 設計 LTR 的 primer 做07/25 12:09

21^F→silverberry:minus strong-stop cDNA 的 qPCR。07/25 12:12

22^F→silverberry:先用 viral genome 濃度做參考~07/25 12:12

[北美] J1 簽證有效中回臺灣的問題

[ VISA ]2 留言, 推噓總分: +1

作者: silverberry - 發表於 2014/07/02 12:17(10年前)

2^F→silverberry:感謝 t 大! 我可以安心地訂機票了^^07/02 13:31

[求救] 膜蛋白用一般SDS PAGE跑

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +8

作者: EDONIS - 發表於 2014/07/01 04:32(10年前)

11^F推silverberry:上清液有跑嗎? 如果沒意外的話上清應該也會壓到 band07/09 09:59

12^F推silverberry:如果沒有的話，那 PBS 回溶的那部分是 inclusion body07/09 10:15

13^F→silverberry:的機會比較高。07/09 10:15

Re: [求救] 如何證明我clone的promoter是對的

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +6

作者: xxtomnyxx - 發表於 2014/06/29 18:55(10年前)

9^F推silverberry:可以藉這個標題請教一下，我用 paper 找到的 mouse07/09 10:36

10^F→silverberry:promoter 序列比較 rat 和 human 相同的基因上游區域07/09 10:36

11^F→silverberry:結果序列相似度大約只有 40-50% 左右。07/09 10:37

12^F→silverberry:請問這樣值得一試嗎?07/09 10:37

13^F→silverberry:我要測試的物種是 chinese hamster，相似度也只有 50%07/09 10:39

14^F→silverberry:也是沒有合適的 cell line 可以驗證表現強度....07/09 10:40

[求救] peptide 用DMSO溶還是有不溶的

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: 0

作者: mailtea - 發表於 2014/06/17 22:44(10年前)

1^F→silverberry:請問妳的 peptide AA 組成如何? 要考慮一下電荷!06/18 05:06

4^F→silverberry:是的，配合 control 組一起實驗就沒問題了~06/19 12:16

Re: [求救] 第二代 Lenti packing system 質體純化

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +2

作者: puec2 - 發表於 2014/06/12 15:38(10年前)

2^F推silverberry:感謝 p 大~ 兩個女生在實驗室 overnight 真是一點也不07/17 10:16

3^F→silverberry:浪漫 @ @ 我會注意一下 culture 的時間! 感謝~07/17 10:17

[求救] 第二代 Lenti packing system 質體純化

[ Biotech ]28 留言, 推噓總分: +5

作者: silverberry - 發表於 2014/06/04 05:07(10年前)

3^F→silverberry:midi 抽 pLOVE 產量大約是 mini 的一半到七成06/04 09:26

4^F→silverberry:除了這些載體以外，其他載體很少需要這麼多，06/04 09:28

5^F→silverberry:所以也沒有比較的依據。06/04 09:28

6^F→silverberry:可以請問 grox 大那個小飛碟 elute isopropanol 沉澱06/04 09:30

7^F→silverberry:DNA, 有沒有什麼需要注意的技巧?06/04 09:32

8^F→silverberry:不過 kit 也快用完了，看看換新的 kit 會不會有差!06/04 09:34

9^F→silverberry:感謝^^06/04 09:34

15^F→silverberry:感謝 grox 大! 我會注意這些細節再試試看~ m(_ _)m06/04 11:10

24^F→silverberry:感謝 c 大，pMD2.G 和 psPAX2 我們是用 DH5 alpha06/11 12:01

25^F→silverberry:只有 LTR 的用 stbl3。06/11 12:01

26^F→silverberry:我們 transfection 用的也是 qiagen 的，最近我剛要06/11 12:02

27^F→silverberry:測試 Zymo 和 invitrogen。06/11 12:03

28^F→silverberry:看看好不好用再跟大家分享06/11 12:04

[期刊] Lentivector 設計、製造與純化

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +3

作者: silverberry - 發表於 2014/04/29 04:20(10年前)

2^F→silverberry:感謝 I 大05/03 08:08

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