[求救] Lentivirus titer 測定
大家好，我是 lentivirus 的新手，
想請問版上操作 lentivirus infection 的版大們，
有無推薦的 kit 或是方法測定 lentivirus 的 titer?
在網路上查到很多家不同的 ELISA p24 antigen kit 和不用抽 RNA 可以快速做 qPCR
LTR region 的 kit。
或是用 GFP 類的 reporter 測定 transduction efficiency
也查到 paper 比較分別測定 DNA、RNA 和 protein 量來估計 titer 的方法 (ref. 1)
選擇太多了，不知道哪一個比較適合。
挑幾種買來試試看這種想法應該會直接被碾出實驗室 Orz
我是在化工系的實驗室，
實驗室之前的助理是用體積記錄感染的用量，
結果推算出了轉染率 <0.001% 的實驗記錄。
雖然我看了版上之前的討論文，了解 lentivirus packaging 和 vector size 成反比。
但是用體積來計算實在讓人很崩潰啊 @ @
和指導教授討論以後希望可以精確地用 MOI 之類的數量化方式來繼續這個實驗。
所以想知道大家平常都是怎麼數量化這個步驟的。
謝謝大家。
ref. 1
http://www.nature.com/gt/journal/v9/n17/full/3301731a.html
--
我們用的 lentivirus vector 是 addgene 的
FUW-OSKM 和 pLOVE 系列，
用 psPAX2 + pMD2.G 在 HEK293FT cell 用 lipo2000 packaging.
Packaging 完收的 medium 用 Amicon 100kD 濃縮後，分裝保存在 -80.
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※ 編輯: silverberry (75.72.204.238), 07/19/2014 15:41:33
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