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作者 iceking 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共285則

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[求救] 囧...細胞汙染了

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +4

作者: iem2000 - 發表於 2011/08/26 14:13(12年前)

2^F推iceking:之前凍的拿1~2 vial養看看就知道了08/26 17:23

[求救] Luciferase assay

[ Biotech ]22 留言, 推噓總分: +7

作者: rickkao11 - 發表於 2011/08/23 23:14(12年前)

1^F推iceking:試試Dual luciferase assay , 效率用看的不準~08/23 23:20

6^F推iceking:差異的話，關鍵應該是在cell culture的部分08/24 10:10

9^F推iceking:細胞的變數相當的多,光是有沒有均勻的seed就是一門學問08/24 23:17

10^F→iceking:然後seed細胞後,隔多久時間開始做transfection,這也重要.08/24 23:18

11^F→iceking:如果要overnight,細胞就開始繁殖,細胞數可能就會不一樣多08/24 23:18

12^F→iceking:所以有沒有需要做serum starvation也要評估.08/24 23:19

13^F→iceking:雖然現在的kit大多都說serum不會影響transfection,但依照08/24 23:20

14^F→iceking:經驗,serum free的transfection效果還是比較好,當然,有08/24 23:20

15^F→iceking:commercial的OPTI-MEM的話就用.08/24 23:21

16^F→iceking:然後,也是最重要的一點,就是Luciferase不建議和螢光一起08/24 23:23

17^F→iceking:送進細胞,我以前曾經這樣做過,但在測量冷光及螢光數值時08/24 23:24

18^F→iceking:非常困擾,我還要把well中的細胞平均分到白盤&黑盤當中08/24 23:25

19^F→iceking:測出來變異相當的大. 後來我就改用dual assay了!08/24 23:26

20^F推iceking:dual的plasmid比例很重要,千萬別一味的1:1送進細胞,多try08/24 23:28

21^F→iceking:幾種不同condition 或許plasmid就表現了~08/24 23:29

[求救] 配細胞培養液的正確方法?

[ Biotech ]64 留言, 推噓總分: +32

作者: GauJin - 發表於 2011/08/23 22:59(12年前)

5^F推iceking:B是對的08/23 23:12

7^F→iceking:黴漿菌好像要用.1的Filter (sales說的)08/23 23:14

9^F推iceking:附帶一提:照UV是沒有辦法殺菌的,你可以請學長A爬爬文,看一08/23 23:17

10^F→iceking:下無菌操作台的原理~08/23 23:18

39^F推iceking:我的意思是操作台的UV無法達到實際殺菌效果08/24 10:17

[求救] stacking殘膠

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +3

作者: hoop0227 - 發表於 2011/07/22 16:18(13年前)

5^F推iceking:不是的,是齒梳和玻璃的接觸面沒有密合,你想像一下,07/26 23:24

6^F→iceking:沒有密合的話,stacking buffer一定會跑去那些空隙造成殘膠07/26 23:25

7^F→iceking:有可能comb或玻璃沒有清乾淨,或是表面有傷痕都有可能07/26 23:27

[求救] transfection efficiency normalize

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +5

作者: popopig2000 - 發表於 2011/06/02 16:00(13年前)

1^F推iceking:不行,amp不會表現,不能用來normalize06/02 22:09

[閒聊] 離心時這樣擺真的有balance嘛?

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +8

作者: leoblack - 發表於 2011/05/17 23:44(13年前)

12^F推iceking:沒平衡,乖乖多用一管BALANCE吧05/19 00:36

Re: [求救]有關細胞培養的安全層級

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +6

作者: HEK293 - 發表於 2011/05/03 23:46(13年前)

5^F推iceking:本尊現身說法 XD05/05 20:27

[求救]有關細胞培養的安全層級

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +4

作者: allenoreo - 發表於 2011/05/03 22:01(13年前)

4^F推iceking:危險性比你騎車上路還低. 不小心碰到皮膚有問題的會是...05/03 23:19

5^F→iceking:細胞會不會污染?05/03 23:19

[方法] 打破細菌萃取蛋白的方法?

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +3

作者: qwer0211 - 發表於 2011/04/28 15:36(13年前)

3^F→iceking:破菌的方法很多,google很好找04/28 22:35

[求救] 請問定量 western 的軟體！

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +6

作者: feelpink - 發表於 2011/04/27 16:32(13年前)

3^F推iceking:這軟體要找代理商,印象中是騰達行吧~ 不建議個人買,要買04/27 23:00

4^F→iceking:也要叫老闆出錢~04/27 23:00

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