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作者 FENOR 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共94則

限定看板：Biotech

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Re: [求救] 菌長出來裡面什麼都沒有

[ Biotech ]31 留言, 推噓總分: +13

作者: waitingu - 發表於 2011/01/21 18:02(13年前)

29^F推FENOR:其實問題在我發問後過了幾個小時就找出來了...至少是找出01/24 00:28

30^F→FENOR:其中一個，當時是在考慮抗生素的問題。所以當時用了新泡01/24 00:29

31^F→FENOR:的kana去篩選之後就成功的挑出了有construct的clone01/24 00:29

[求救] PCR遇到lid heat failure

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +4

作者: fentanyl945 - 發表於 2011/01/20 22:52(13年前)

3^F推FENOR:先顧好你的機器吧....那台掛了可不是幾十萬可以了事的01/21 14:54

4^F→FENOR:你的Taq應該已經乾掉失去活性了，重p也沒用01/21 14:55

[求救] 菌長出來裡面什麼都沒有

[ Biotech ]28 留言, 推噓總分: +8

作者: FENOR - 發表於 2011/01/20 16:51(13年前)

2^F→FENOR:應該不是，我只養了16-18小時(transform完)01/20 17:06

3^F→FENOR:挑菌養到MEDIUM裡面也只養了六七個小時就抽了01/20 17:07

7^F→FENOR:跟空的vector比@@ 其實我只是想先看看裡面有沒有東西而已01/20 18:13

8^F→FENOR:晚點我來transform一個只有vector的好了01/20 18:14

14^F→FENOR:是連vector的band都沒有......抗生素是新的01/20 18:25

15^F→FENOR:抗生素的濃度應該是剛好。01/20 18:26

16^F→FENOR:況且就算是雜菌，應該也要有genomic或者是一些小片段01/20 18:27

22^F→FENOR:樓上提到的這點我沒考慮過@@ 剛好有儀器，晚點來試試看01/21 00:56

[閒聊][新聞]日本要讓長毛象復活

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +6

作者: CErline - 發表於 2011/01/19 01:45(13年前)

8^F→FENOR:很難，真的就那麼肯定長毛象的gene能夠有效的控制大象內的01/21 14:57

9^F→FENOR:胞器嗎? 幾個nt的不同就可能差好幾的氨基酸01/21 14:57

[求救] ligation都接不起來

[ Biotech ]56 留言, 推噓總分: +14

作者: ennnnno - 發表於 2010/12/27 11:12(13年前)

5^F推FENOR:V:I用1:3，然後把除了ligase之外的東西都加好，接著用一杯12/27 12:07

6^F→FENOR:70度的水，把混有這些東西的eppendorf放進去(上浮船)12/27 12:08

7^F→FENOR:溫度降到30-40度時再拿出來離心加入ligase，ligate一小時就12/27 12:08

8^F→FENOR:可以拿去transform了。12/27 12:08

13^F推FENOR:慢慢降12/27 19:04

47^F推FENOR:你為什麼沒做heat shock????12/30 00:18

48^F→FENOR:我用的ligation buffer其實在室溫下回溫也沒差12/30 00:19

49^F→FENOR:而且heat shock完之後要用LB medium讓菌recover12/30 00:20

50^F→FENOR:時間也不用太長，大概十分鐘到十五分就可。12/30 00:20

51^F→FENOR:heat shock 30-90秒都可以12/30 00:21

54^F推FENOR:喔喔，因為我也沒用過這種的細胞12/30 11:53

[求救] luciferase reporter該在甚麼時候transfect進去呢?

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +4

作者: FENOR - 發表於 2010/12/19 16:47(13年前)

6^F→FENOR:目前正在嘗試一起送12/20 22:52

12^F→FENOR:最剛開始一起transfect進去看起來是reproducible12/30 22:25

[求救] 菌長的速度變得好慢

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +7

作者: FENOR - 發表於 2010/11/07 18:33(13年前)

5^F→FENOR:加鐵???11/08 14:03

8^F→FENOR:我是有猜過是不是前一個月常常停電的原因= =11/08 15:46

9^F→FENOR:好死不死那台負八十沒接緊急電源11/08 15:46

10^F→FENOR:其實實驗室接好像沒有負八十接緊急電源的....11/08 15:46

[求救] DMSO對於細菌的傷害程度

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +1

作者: FENOR - 發表於 2010/10/11 10:41(13年前)

2^F→FENOR:quickchange DH5a10/11 12:58

[求救] clone不出來

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +2

作者: JuneTiger - 發表於 2010/09/25 22:39(13年前)

6^F推FENOR:你的問題是不是要再那個2.8K的gene前或後端接上flag09/26 15:18

7^F→FENOR:如果是的話，當初我也做過類似的東西，不過我用的是類似09/26 15:19

8^F→FENOR:做shRNA的方法，先訂兩條primer，接著讓他們在高濃度下黏合09/26 15:19

9^F→FENOR:最後黏合出來的產物跟已經切好的PCR product一樣，再將其09/26 15:20

10^F→FENOR:接入。09/26 15:20

[求救] mutagenesis有辦法插13個nucleotides進 …

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +3

作者: FENOR - 發表於 2010/09/23 13:10(13年前)

3^F→FENOR:其實是因為每次長都只長一顆...剛好這顆就有中09/23 13:41

4^F→FENOR:我總共transform三次，剛好三顆colony09/23 13:41

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