[求救] DMSO對於細菌的傷害程度

看板Biotech作者 (FENOR)時間13年前 (2010/10/11 10:41), 編輯推噓1(1推 0噓 6→)
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小弟我在mutagenesis的過程中加入了DMSO(因為太過GC-rich) 然後在PCR跑完之後就直接拿去transform， (transform:1. mix on ice 20min 2. heat shock 90sec 3. recover with LB 40 min) 然後過了大約十六小時後長出了兩顆colony 但是抽出來測濃度的時候卻顯示我沒有抽出任何東西! 那兩顆很可能好死不死是抗kanamycin的雜菌...... 我想請問一下，再加入了DMSO的情況下， PCR跑完之後是不是去做clean up會比較好? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.125.84
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哪一牌的kit跟comptent cell?
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quickchange DH5a
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推
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quickchange的quick soultion我覺得就是dmso..特性一
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樣．．另外照他標準的protocl取那2ul不足以影響到
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ecoli的生長 而且你也欠缺tramsform的positive contr
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ol (DH5A會不會把linear form DNA 接成plasmid ??)
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DH5a是可以把nick接起來,但原po應該先跑膠確認產物再transf
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