Re: [求救] 誘導表現蛋白質
※ 引述《Talen (找到答案了~)》之銘言：
: ※ 引述《u8524009 (VIP好人卡....)》之銘言：
: : 要先問一下你所謂的破菌後蛋白質少很多..是你用那一個fraction去跑膠得到的結果
: : 不曉得你有沒有測過你的目標蛋白質是soluble form還是inclusion body?
: : 假設你的蛋白質是inclusion body,而你取上清液去跑膠;
: : 亦或是你的蛋白質是soluble form,而你取離心後不溶的pellete去跑膠
: : 都會得你像你所說的破菌後,蛋白質減少很多的現象
: 謝謝你的回應～^^
: supernatant 和 pellet 部分都有做
: 我有用anti-his偵測我的目標蛋白是在 supernatant
: 破菌後取固定菌數 loading 跑 SDS-PAGE 發現我的目標蛋白相對量減少很多
: 目前我在懷疑我的蛋白會不會被 degrade
: 是否可以加入類似PMSF的protease inhibitor來操作實驗呢？？
我最近也在做這實驗....但很不順利
請問你的protocol可以分享嗎？
我也會定期和你討論我的結果...謝謝
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05/09 09:41, , 1F
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