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討論串[求救] 誘導表現蛋白質
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#9
Re: [求救] 誘導表現蛋白質
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者BHIboy (開心熊)時間18年前 (2007/05/11 21:27), 編輯資訊
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請問一下您的蛋白質分子量是多少?. 基本上大於100 kDa的protein在E. coli內的表現就會比較不好. 另外真核membrane protein可能會有一些修飾作用, 在E. coli內無法進行而有毒性. Membrane protein也很容易形成inclusion body. 如果先
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#8
Re: [求救] 誘導表現蛋白質
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者renshiue (UW-Madison)時間18年前 (2007/05/11 07:31), 編輯資訊
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這個會部份表現在DT上。你沒測就說沒測就好了。. 蛋白多大？含多少positive charged residues？. 另外如果你曾有染到（assuming CBB R-250）過這個蛋白，那麼SDS-PAGE這樣的. 產量也許還是可以看到, or over-destain?. 另外medium也
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#7
Re: [求救] 誘導表現蛋白質
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者bigfourx (飄零~)時間18年前 (2007/05/10 13:06), 編輯資訊
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^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^. 你有去確認過你的CODON是Ecoli要的嗎~~~~~. 如果沒有 可能試著做看看Rosseta 要要看. 它可以補充 7種 E. coli缺的7種真核的codon. 膜蛋白的表現原本就比較少~~~不好拿~~(聽說囧) 勝任細胞沒做
#6
Re: [求救] 誘導表現蛋白質
推噓3(3推 0噓 5→)留言8則，0人參與, 最新作者content71 (羅莉飼養中...)時間18年前 (2007/05/09 10:13), 編輯資訊
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※ 引述《pneumonia.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (JUAN)》之銘言：. 先對原PO說聲不好意思，借用你的標題. 因為我也遇到induction的問題急著想找人幫忙. 我的狀況是. vector : 真核human membrane protein接入pET28a
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#5
Re: [求救] 誘導表現蛋白質
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者pneumonia.時間18年前 (2007/05/08 19:45), 編輯資訊
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※ 引述《u8524009.bbs@ptt.cc (VIP好人卡....)》之銘言：. > ※ 引述《Talen (找到答案了~)》之銘言：. > : 最近正在做表現蛋白質的實驗. > : 利用pET30a接入欲表現的蛋白質(約30 KD)後. > : 送入BL21(DE3)中 加入IPTG以誘導表
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