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veltine 在 PTT 最新的發文, 共 11 篇
veltine 在 PTT 最新的留言, 共 60 則
42F推:100%這個數字在生物學上行不太通,就好像一開始碰cloning08/08 16:52
43F→:一直以為enzyme在它喜歡的buffer裡,就會有100% activity08/08 16:54
44F→:其實不然,雖然做double digestion但是難保vector同時被08/08 16:56
45F→:兩種enzyme切到;以你的問題為例,說不是你的vector只被切08/08 16:59
46F→:一刀,vector只留一個cutting site,ligation時…insert08/08 17:00
47F→:只有一邊被接上,造成你的vector only的plate長很多…08/08 17:02
48F→:vector+insert的plate長很少,當然這只是推測…Orz08/08 17:03
49F→:建議確認vector上的MCS沒有壞,用EcoRI及另距離一很遠的08/08 17:06
50F→:enzyme切切看,sequencing也是可以確認但有時不怎對...Orz08/08 17:07
6F推:我抽完大量之後的plasmid,用TE溶之後都給它大力的vortex09/28 21:14
7F→:之後放在4℃,一個月之後拿出來再vortex,轉到細胞上還是09/28 21:15
8F→:有螢光,不過genomic DNA要是vortex,嗯嗯…就再重抽一次09/28 21:16
9F→:吧…Orz…我的經驗不負責任的供你參考…09/28 21:17
2F推:製造上多利用燻硫及氧化作用,以達殺菌、漂白及去蟲的效果09/21 22:40
3F→:經該步驟處理後,必須立即煮沸,以去除殘留之硫。09/21 22:40
4F→:我是用滅菌過的…但是別把牙籤丟進LB裡,沾一下LB就好…09/21 22:41
5F→:每次都養的到菌…供你參考09/21 22:42
8F推:再養不出來的話…用tip挑菌養看看…09/21 22:45
9F→:不然就是你的抗生素濃度太高…殺光光…09/21 22:46
12F推:都試試吧…用牙籤和tip及換個人養看看…Orz09/21 22:50
3F→:這是我三年前做的實驗…protocol就是你打的那樣子…09/16 16:03
4F→:sorry...我也沒寫下來…全是依照data sheet上做的…09/16 16:04
6F→:抱歉我搞錯了…fluo-4也是Pluronic溶的,Probenecid是另09/16 17:11
7F→:一種kit…09/16 17:11
4F推:看看ligation buffer有沒有沉澱…另外加ATP試試看…09/13 17:21
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暱稱:Time go by~~~
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