[方法] ligation的問題...

看板Biotech作者 (新綠園說不關了)時間16年前 (2008/09/13 16:24), 編輯推噓5(502)
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我有一段要接進去的gene 大小約1K 可是他的前後接位都是EcoR1 vector 我有加CIAP 作用 37度 30 min ligation volume控制在20 ul mol為 Vector: 0.7 pmol gene : 6 pmol 2 unit T4 ligase (genemark) 可是接不進去... 有請先進幫幫我... 我已經失敗兩週了... PLEASE -- 如果你喜歡懷念[味全龍] 請光臨Dragons 如果你也是喜歡["老洋基迷"] 請光臨NY-Yankees 如果你喜歡我的[文筆] 請光臨http://blog.yam.com/dreamyskyblue -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.90.35

09/13 16:39, , 1F
我都做5 uL而耶... 16 度 overnight
09/13 16:39, 1F

09/13 16:50, , 2F
試試看overnight! 還有genemark的ligase我認為效率不太高~
09/13 16:50, 2F

09/13 16:51, , 3F
跟promega比起來~我比較喜歡用promega~~呵!
09/13 16:51, 3F

09/13 17:21, , 4F
看看ligation buffer有沒有沉澱…另外加ATP試試看…
09/13 17:21, 4F

09/13 23:54, , 5F
OVERNIGHT+1
09/13 23:54, 5F

09/13 23:59, , 6F
請問一下 你的接不進去 是怎樣判定的?
09/13 23:59, 6F

09/15 01:45, , 7F
兩周兒已= ="" 話說一開始我失敗了兩個月
09/15 01:45, 7F
文章代碼(AID): #18otZ0st (Biotech)
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