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作者 rivis 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共37則
限定看板:Biotech
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11F推:primer的方向性是不是寫錯了?09/25 17:42
12F推:看不出來會形成dimer,產物拿去定序看看吧09/25 17:46
15F推:buffer ?09/23 21:57
2F推:所以乾脆改成用chip作,不是皆大歡喜06/13 17:19
1F推:Taq有proofreading嗎?有的話就不會有A06/08 14:29
4F→:問題沒頭沒尾的,表現量?Tag?不同原因有不同解決方法.....05/06 11:50
1F推:1. 都可以,看你方便 2.3.4.是一樣的問題,CsCl經長時間05/06 11:46
2F→:離心,其實就會形成gradient,病毒自然會落在你想要的分層05/06 11:47
3F→:請較詳細說出你遇到的問題,不然不知道該如何幫你05/06 11:48
3F推:通常老鼠你一抓起來,他馬上就會尿出來的09/04 16:10
2F→:我的看法推到前一篇去了,請你回去參考一下08/30 18:23
9F推:因為是做突變蛋白,所以更要注意結構問題08/30 18:16
10F→:不然投稿時,reviewer會質疑你突變後失去活性08/30 18:17
11F→:是因為refolding後結構改變而造成的失活,與你的點突變無關08/30 18:17
12F→:到時你解釋不了,整篇都得重來08/30 18:19
13F→:我的看法是,refolding是下下策08/30 18:19
14F→:除非你是不在乎結構,只要有活性就可以,也不重要08/30 18:21
15F→:才考慮denature與refolding,否則只是自找麻煩08/30 18:21
16F→:建議從少少的soluble部分去做還比較可行08/30 18:22
17F→:不然就換表現系統08/30 18:22
1F推:看不懂你的問題,飽和SDS-PAGE濃度是啥?08/28 16:18
2F→:基本上Urea並不會干擾SDS-PAGE電泳08/28 16:18
3F→:guanidine HCl 才會干擾08/28 16:19
4F→:urea很難去除,要緩慢透析很久,但protein很可能再沈澱下來08/28 16:21
5F→:跑膠會糊糊的可能loading太多了,減量再試試看吧08/28 16:22
6F→:建議你看一下refolding的方法08/28 16:23