[求救]請問病毒純化方法
小弟目前純化病毒不太順利
想請問各位大大有關病毒純化的方法
我是用CSCl不連續密度梯度離心法 純化細胞內的病毒顆粒
將CSCl溶於TNE內 以40% 4ml, 30% 3ml, 20% 2ml
利用5ml塑膠管逐步沿著管壁加入離心管內
1,請問各位在拉梯度時是用什麼器具將CSCl注入離心管內?
我是先加高濃度在逐次往上加低濃度
但書上大多寫先加低濃度再加高濃度於低濃度下，將低濃度往上推
2.是否一定要拉出40% 30% 20%間有明顯界線呢?(避免各層間混合)
3.當CSCl不連續梯度拉完後，是否須馬上在頂部加入待離病毒液呢?
4.當離心時間很久會不會將待測物離過頭呢?(跑到離心管底部)
5.如果改用”等密度”梯度離心是否更適合呢?
因為看了很多網路資料有太多方式不知如何擇一
想請問板上各位大大的經驗分享，先謝謝大家囉
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