作者查詢 / Marriott
作者 Marriott 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共34則
限定看板:Biotech
看板排序:
7F推: 你是有refolding相關需求才用pET32a? 若不是,你要想10/23 11:02
8F→: 想到時候你目標蛋白N段前面可是會多不少東西啊 (前面10/23 11:02
9F→: 已經有atg,你加不加都無所謂),到時候還要多一道切的10/23 11:02
10F→: 步驟10/23 11:02
4F推: 但不用太期盼會有很好的效果08/23 22:14
5F→: talon完後 再多上支MonoQ/S??08/23 22:16
5F推: 懷疑不夠純 先跑片sds page吧08/23 15:24
2F→:感謝11/29 23:10
9F推:15N-HSQC05/23 20:03
7F→:UPC-900好像波長不能變,unicorn操作介面就沒有波長的選項03/22 19:41
8F→:UV-900就可以03/22 19:42
2F推:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1253625112/14 16:40
1F推:算純化的一個手段吧11/28 21:46
2F→:我以前的實驗室有一個金剛蛋白,破完後就直接90度下去煮11/28 21:48
3F→:其他蛋白都沉澱光了,只有他還好好的活在supernatant11/28 21:50
1F推:用看的應該分不出來是salt or protein的xtal吧08/31 19:55
2F→:直接mounting去打最準確08/31 19:56
3F→:看fluorescence或用izit dye 也可以作作看08/31 20:00
1F推:濃度算是case by case05/25 19:24
2F→:從每一次titration的趨勢,基本上能看出有無interaction05/25 19:26
3F→:濃度設定太高或太低 fitting出來的data會不太準05/25 19:29
4F→:也不太好看就是05/25 19:29
5F→:你用的是itc200的話,大致預測Kd value05/25 19:36
6F→:他會幫你去預設在cell及syringe中合適的濃度05/25 19:37
7F→:題外話 你用vp-itc的話,1mM protein放cell要1.5ml05/25 19:42
8F→:多作幾次ITC,光純化protein就不知道要純化多久05/25 19:46
9F→:我遇過的case,uM就夠了.滴過非protein,才有用到mM這麼高05/25 19:57