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作者 Ianthegood 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共1561則

限定看板：Biotech

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Re: [求救] FPLC純化蛋白(補新問題)

[ Biotech ]2 留言, 推噓總分: +2

作者: SHARKr1 - 發表於 2019/02/11 15:00(5年前)

1^F→Ianthegood: 個人沒用過hic 不過經驗是流速絕對影響前面那個peak01/24 02:49

2^F→Ianthegood: 大概是pressure peak 回收量低很有可能是你sample loa01/24 02:49

3^F→Ianthegood: d太少01/24 02:49

17^F→Ianthegood: 只能用hic? 要不試試iex?01/24 22:16

23^F推Ianthegood: 推專業02/11 22:26

[求救] ligation 測濃度 dsdna 濃度超高OAO

[ Biotech ]91 留言, 推噓總分: +3

作者: yiimingg - 發表於 2019/01/22 18:56(5年前)

7^F推Ianthegood: 跑膠定量吧01/22 22:44

16^F→Ianthegood: 切膠怎麼做的純化後有跑膠嗎01/24 00:38

21^F→Ianthegood: 分別切兩次？為何？01/24 22:17

22^F→Ianthegood: 然後EB是什麼?01/24 22:18

23^F→Ianthegood: 你怎麼純化的？一開始就問了好像都沒回答01/24 23:28

24^F→Ianthegood: 然後濃度怎麼測的 spec還是nanodrop01/24 23:28

40^F→Ianthegood: 單從cloning角度來看，能夠double digest就絕對不要01/25 20:04

41^F→Ianthegood: 分開做，只要多一個步驟就是會掉產量。再加上你中間過01/25 20:04

42^F→Ianthegood: column(我猜的，你也沒講)跟後面切膠(也是猜的，你沒01/25 20:04

43^F→Ianthegood: 講)都是回收很容易很慘的地方。要提高產量無他，增加01/25 20:04

44^F→Ianthegood: 反應物的量，減少步驟。nanodrop(我猜的，你沒講)讀01/25 20:04

45^F→Ianthegood: 值10ng/ul以下基本上跟noise分不出來，我可以跟你說你01/25 20:04

46^F→Ianthegood: insert裡面大概都是水。01/25 20:04

47^F→Ianthegood: 再來一點elution buffer(哪個牌子的什麼kit都不講)這01/25 20:11

48^F→Ianthegood: 種東西通常是Tris EDTA，意思是你的第二支RE如果需要201/25 20:11

49^F→Ianthegood: + cation，你那個rxn就等於白跑了01/25 20:11

65^F→Ianthegood: https://nebcloner.neb.com/#!/redigest01/28 06:16

66^F→Ianthegood: 3.1還是可以一起切01/28 06:16

67^F→Ianthegood: 個人偏好可以用ethanol precipitation就不要過column/01/28 06:18

68^F→Ianthegood: beads 回收率一定比較低01/28 06:18

69^F→Ianthegood: 為什麼會實驗室沒人帶做cloning 連double digest都沒01/28 06:20

70^F→Ianthegood: 教01/28 06:20

73^F→Ianthegood: 連RE都沒人帶了你要他試gibson 樓上別鬧了01/29 07:08

87^F→Ianthegood: 兩隻一起切切20ug+ o/n 然後全部切膠純化這是過去1001/31 08:58

88^F→Ianthegood: 年都在做cloning的人給的意見聽不聽隨你反正不是我01/31 08:59

89^F→Ianthegood: 要畢業01/31 08:59

[求救] FPLC純化蛋白

[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +6

作者: wizchoco - 發表於 2019/01/24 00:53(5年前)

1^F→Ianthegood: 個人沒用過hic 不過經驗是流速絕對影響前面那個peak01/24 02:49

2^F→Ianthegood: 大概是pressure peak 回收量低很有可能是你sample loa01/24 02:49

3^F→Ianthegood: d太少01/24 02:49

17^F→Ianthegood: 只能用hic? 要不試試iex?01/24 22:16

[求救] 怎麼帶trizol跟冷凍樣品進出國

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +5

作者: iPad8 - 發表於 2019/01/24 17:08(5年前)

2^F→Ianthegood: 直接冷凍蝦子回來會不會比較簡單？01/24 22:14

3^F→Ianthegood: trizol是phenol/chloroform 絕對管制揮發可燃性液體01/24 22:15

[求救] E. coli S17菌株subcloning問題請教

[ Biotech ]24 留言, 推噓總分: +3

作者: Faustus73 - 發表於 2019/01/07 15:44(5年前)

16^F推Ianthegood: 我覺得很多e coli裡面發生的事情都還未知多挑幾顆真01/14 04:09

17^F→Ianthegood: 的無妨我colony pcr一次也都一盤XD01/14 04:09

20^F→Ianthegood: 隨手狗了一下 s17是cloning strain沒錯啊所以B大說得01/14 17:03

21^F→Ianthegood: 對 Ecoli是無辜的01/14 17:03

[討論] MTT放太久會怎樣嗎？

[ Biotech ]14 留言, 推噓總分: +4

作者: TsushimaRiko - 發表於 2018/12/28 14:40(5年前)

2^F推Ianthegood: 如果你盤子上有拉standard curve就可以嘗試啊12/28 20:06

4^F→Ianthegood: 不然勒12/28 23:28

7^F→Ianthegood: 你如果只是要用這個來決定實驗要用的參數像是加藥濃12/30 01:51

8^F→Ianthegood: 度那還有點參考價值你如果要放論文放paper 沒有電你12/30 01:51

9^F→Ianthegood: 的就不是及格的科學家12/30 01:51

[討論] 水浴鍋替代方案

[ Biotech ]45 留言, 推噓總分: +16

作者: pttyoyoloxa - 發表於 2018/12/21 00:49(5年前)

1^F推Ianthegood: 坑裡面噴點水不然efficiency會降低12/21 02:10

23^F→Ianthegood: 再尖都不會是完美閉合啊12/23 18:30

44^F→Ianthegood: 加點水就可以解決的事情錢省下來買藥不好嗎01/05 15:02

請問為何光線通過sample是延遲1/4波長？

[ Biotech ]29 留言, 推噓總分: +1

作者: efc1976 - 發表於 2018/12/07 11:23(5年前)

1^F→Ianthegood: 不一定是啊但是常見的biological sample厚度都在那12/07 17:41

2^F→Ianthegood: 附近12/07 17:41

5^F→Ianthegood: 相位差就是建設性干涉扣掉破壞性干涉造成的啊12/13 23:29

[求救] PCR的升降溫速度

[ Biotech ]41 留言, 推噓總分: +7

作者: GDCOC - 發表於 2018/12/07 11:53(5年前)

16^F推Ianthegood: 很多機器可以設ramp 不過會真的去測的你是我聽過的第12/07 17:35

17^F→Ianthegood: 一個推一個12/07 17:35

18^F推Ianthegood: pcr大概都是peltier element 測溫跟加熱算是一起的12/07 17:39

19^F→Ianthegood: 所以應該沒壞大概是設計就是這樣那你也只能在這台12/07 17:39

20^F→Ianthegood: 機器的特性下去修改你的條件(buffer, program,etc)12/07 17:39

21^F→Ianthegood: 所以寫paper才要寫明機器的牌子XD12/07 17:39

[求救] 打Mass結果判斷

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +3

作者: jeffchu731 - 發表於 2018/11/29 04:05(5年前)

1^F→Ianthegood: 序列一條一條copy起來去blast啊不然勒11/29 07:24

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