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yiimingg 在 PTT 最新的發文, 共 1 篇

[求救] ligation 測濃度 dsdna 濃度超高OAO

[ Biotech ]91 留言, 推噓總分: +3

作者: yiimingg - 發表於 2019/01/22 18:56(5年前)

yiimingg 在 PTT 最新的留言, 共 39 則

[求救] ligation 測濃度 dsdna 濃度超高OAO

[ Biotech ]91 留言, 推噓總分: +3

作者: yiimingg - 發表於 2019/01/22 18:56(5年前)

8^F→yiimingg: 是病毒和載體XD 準備做chimeric virus，關於跑膠定量我01/23 00:52

9^F→yiimingg: 是病毒和載體XD 準備做chimeric virus，關於跑膠定量我01/23 00:52

10^F→yiimingg: 明天會再查資料嘗試看看，感謝大大們( ‧ 蹏s‧? )01/23 00:52

12^F→yiimingg: 我是分別digestion 的，用Ecor1 和Bgl2 一個是2.1 buff01/23 11:04

13^F→yiimingg: er，另外一個是 3.1 buffer，digestion 後都有跑膠看大01/23 11:04

14^F→yiimingg: 小，都坐落在合理的位置，做了一學期都搞不出來QQ 請問01/23 11:04

15^F→yiimingg: digestion 後還有什麼方式可以確認大小嗎？01/23 11:04

17^F→yiimingg: 我是分別digestion 2次，第一次O/N 後沒有跑膠，直接用01/24 12:41

18^F→yiimingg: EB 洗出來，第二次digestion 後才跑膠的01/24 12:41

25^F→yiimingg: 但考慮到發文求救所digestion 出來的產物不可用，我就01/25 11:33

26^F→yiimingg: 再digestion 一次，昨天得出來的值是Insert : 260/280:01/25 11:33

27^F→yiimingg: 1.37, 4.8ng/ulVector : 260/280: 1.81, 67.94ng/ul01/25 11:33

28^F→yiimingg: 我就分別用 1:3 和1:7 的比例去ligation01/25 11:33

29^F→yiimingg: EB 就是elute buffer01/25 11:33

30^F→yiimingg: 是因為所使用的酵素buffer 分別是 Buffer 2.1 和 Buffe01/25 11:35

31^F→yiimingg: r 3.1，所以分兩次切01/25 11:35

32^F→yiimingg: 至於上頭為何放任，我想這是實驗室第一次做 chimeric v01/25 11:37

33^F→yiimingg: irus，所以上頭也放手讓我自己嘗試找答案OAO01/25 11:37

34^F→yiimingg: 請問妳是說什麼程序後的純化ㄋ？01/25 11:40

36^F→yiimingg: 請問這和我求救的點有相關性嗎？QQ01/25 16:01

50^F→yiimingg: 原來芽～我是用DH5a！我的內容是要連續接4種insert 進01/26 09:07

51^F→yiimingg: 去一個 vector裡面，前面的2種insert 學姐都是用DH5a，01/26 09:07

52^F→yiimingg: 換我接手，是要接進去第3種insert～01/26 09:07

53^F→yiimingg: 我得到的insert 和 vector 都有被定序過01/26 09:09

54^F→yiimingg: 一個是buffer 2.1 一個是buffer 3.1，所以我才分開dige01/26 09:11

55^F→yiimingg: stion，請問，是否有方法可以一起digestion 嗎？（尋求01/26 09:11

56^F→yiimingg: 更好的解決方案01/26 09:11

57^F→yiimingg: 第一次digestion 後沒有跑膠，單純用kit 洗出來，就因01/26 09:14

58^F→yiimingg: 為怕回收率太低01/26 09:14

62^F→yiimingg: 第一次digestion 後，我就只是clean up 然後elute 出來01/26 12:31

63^F→yiimingg: ，第二次才跑膠01/26 12:31

81^F→yiimingg: 我看到您推薦的網址惹！結果我就是用NEB家的酵素，但是01/30 16:00

82^F→yiimingg: 我會分開切是因為之前有去對比過Ecor1 用buffer 2.1的01/30 16:00

83^F→yiimingg: 酵素活性100* 但是用buffer 3.1只有50～但這次再做不01/30 16:00

84^F→yiimingg: 出的話，一起切也是個好方法^^01/30 16:00

85^F→yiimingg: 也不是沒人教，老師有教過跑整套cPCR 現在又換了不一樣01/30 16:04

86^F→yiimingg: 的DNA，不一樣的product，條件我還是要自己抓啊……01/30 16:04

90^F→yiimingg: 謝謝 :)01/31 12:24

[問題] 錄取了成功大學消失

[ Tainan ]322 留言, 推噓總分: +144

作者: howard24 - 發表於 2018/03/23 08:27(6年前)

170^F推yiimingg: 台南的食物芽！OAO03/23 10:50

[閒聊] 日本人真的都會把成績排行貼在告示欄？

[ C_Chat ]576 留言, 推噓總分: +346

作者: blasheep22 - 發表於 2018/02/01 06:03(6年前)

83^F推yiimingg: …… 我ㄉ國家也是這樣芽OAO02/01 07:30

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