Re: 請問點TLC片的時候
※ 引述《kentai (為什麼沒有愛 在我們之間)》之銘言：
: 我還是沒做出來>< 可恨阿
: 不論如何都得不到一個點的管><
: 我把我的步驟寫一下 看大家看一下有什麼錯誤
很多的部分前面的版友都講過了..
我也是建議你請人帶你做一次吧...
看起來閣下應該沒啥流column的經驗
: 東西有三個點 剪一片約六公分的TLC 用純EA去跑
一般少用單一溶劑去流管柱
: 距離上端0.5cm有一個點 再間隔1cm有第二點(產物) 再間隔1cm有第三點
: 感覺是分的很開
Rf值太高了..
這樣你EA一灌下去,Rf值0.5跟0.8的點老實說沒啥分離到...
請將主要的點調在Rf＝0.3左右,也就是說請換沖提液的極性..
用hexane/EA這個系統是比較普遍的選擇..
: 準備Packing Gel 用的是silica gel 使用的column是250ml 直徑大概5cm吧
: 用Hexane packing ,Gel大概有20cm高，加壓1次10分鐘 做5次
如果你真的覺得那麼難分,可以用濕填的,效果會比較好（不過你的應該不至於難分）
: load大概有3cm ，等到跑到乳化面的時候，慢慢加入EA 開始跑
loading太高,一般請在1公分左右..
請換大一點的管柱不然就分兩次流吧
你極性就已經那麼高了,還loading那麼厚一層,這樣當然很容易mix在一起
: 用12x75mm的試管去接 20管左右有第1點 23~26有兩點 27~點消失約80管 有三點
: 所以我大部分的產物都混在三點裡面 好痛苦阿><
: 另外 Gel常常跑了卻產生龜裂的現象 明明沒乾 不知道為什麼@@
因為沖提液極性變太快了
基本上你packing時就可以用hexane/EA（Rf＝0.3左右）的系統去packing了
然後流的時候就不用換沖提液了,自然也就不會龜裂了
如果你真的覺得後面出來的點太慢了,可以慢慢提高沖提液極性將後面的衝出來
當然前提是你前面的點已經出來了
如果是大量的而且又如你所說點與點之間分隔得很遠的話
那其實用一下簡單的flash column也可以快速得到不錯的分離效果
: 不知道大家有什麼意見>< Thx!
: ※ 引述《WEINUO (擁抱現在)》之銘言：
: : 30公分算可怕嗎@@?
: : 我有看過PACKING將近50公分的....而且直徑4公分
: : 實驗室還有一支...直徑大約有十公分的..COLUMN~至於總長度也有50公分以上
: : ..在加壓下..時間大約30分鐘~應該不難吧..
: : 我說的是~~不算一開始的packing和loading..也不算濃縮的時間
: : 熟練的人30分鐘就可以收完了....
: : 主要的關鍵在solvent..如果是要收二個點以上..中途要換solvent 的比例
: : 那自然就很難30min收完
: : 本來實驗室的人也不信...但看過資深的流過直徑2.5cm的column
: : 大約30分鐘......
: : 尤其是直徑愈小的column~完成時間愈短..~
: : 多流就會愈快....
: : 只是在工廠...做大量的都是做結晶....不太流column..
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