Re: [求救] miRNA predict (PITA, targetscan..)

看板Biotech作者 (人類胚胎腎細胞293)時間13年前 (2013/01/25 11:25), 編輯推噓2(204)
留言6則, 2人參與, 最新討論串3/4 (看更多)
: 補充問題: 目的: 以CD105(human)為例,我想要找到可以target它的miRNA : 過程 我先利用 Entrez database去找他的gene symble :ENG : 然後 我到 targetscan 首頁 : 在2. Enter a human Entrez Gene symbol : 輸入ENG : Q1 但在3 的地方我不知道該選什麼,但我看了 : broadly conserved/ conserved* /poorly conserved : 差異,在這個地方我該怎麼選 我還是沒頭緒 : 是要選broadly conserved嘛? 如果是做人類miRNA,其實conservation的資訊影響不很大。 只是因為non-coding RNA如果在各物種間的功能一致,一般認為較不受生物 多樣性影響。所以通常3.這細目我是不設定。 : Q2 假設在step3 都不選,直接按 submit 進去 : 出現了兩個 NM_000118 (905 nt) : NM_001114753 (670 nt) : 我卻不知道該怎麼判斷哪一段好,是選較長的嘛? 這兩個accession分別是: NM_000118.2 endoglin isoform 2 precursor (S-endoglin) NM_001114753 endoglin isoform 1 precursor (L-endoglin) 你可能要先看看你要的是哪一段mRNA。 : Q3 然後假設點了NM_000118進去後,再來是挑選 mi-RNA : 應該是要選conserved 吧, conseved 應該會比poor conseved的好 : 但為什麼他的網站還要列出poor-conseved? 通常TargetScan預測的broadly conserved miRNA in vertebrates會直接顯示在 最上面那條藍藍棒子(indicates 3'UTR of your interested mRNA)上 如果沒有,則表示加權分數都未達該網站預測的閾值。 下方的list則是seed seq的比對,由於miRNA對mRNA的影響除了完全辨識接合 seed seq之外,也可以接受mismatch然後進入p-bodies(not gonna be degraded) 所以有一定機率在這個list上的miRNA也會有功能。 當然也不用對結果太失望,你可以嘗試其他網站。 PicTar, microRNA.org, DIANA-mT, 等等,另外也有些網站幫你蒐集各大站的結果 例如mirDIP( http://ophid.utoronto.ca/mirDIP/search.jsp )等。 如有任何錯誤還請各位先進不吝指教囉~祝你好運 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.53.168

01/25 20:34, , 1F
有些gene雖然功能一致 non-coding region差不少哦 不少
01/25 20:34, 1F

01/25 20:35, , 2F
seq在human與mouse之間差滿多的~ 然後不要太相信Target
01/25 20:35, 2F

01/25 20:35, , 3F
Scan上面列的物種間的seq 大部分的情況下他是錯的!!!!!
01/25 20:35, 3F

01/25 20:37, , 4F
要確定seq是否有conserved最好還是自己alignment 目前
01/25 20:37, 4F

01/25 20:38, , 5F
我只確定microcosm的物種間seq較為正確
01/25 20:38, 5F

01/25 23:31, , 6F
要直接證明binding,或許AGO2-IP也是個辦法。
01/25 23:31, 6F
文章代碼(AID): #1H0ViqI9 (Biotech)
討論串 (同標題文章)
文章代碼(AID): #1H0ViqI9 (Biotech)