Re: [求救] western blot 全黑

看板Biotech作者 (神奇小馬)時間16年前 (2009/07/01 15:26), 編輯推噓1(105)
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請問一下, 你的二抗比例, 牌子 ECL 哪家的? P牌還是M牌? 只有這抗體會這樣, 還是每種抗體都這樣? CS牌的 caspase 3 不錯用, 是個幾乎沒有雜訊的好物 家裡只有這支是買CS的嗎? 其他有哪些牌子呢? ※ 引述《linwei (我會好好加油^^)》之銘言: : 請益各位 : 因為我第一次遇到這種情況@@ : 我壓的protein 是 cleaved caspase 3 : 使用的抗體是 cell signaling 編號9661 的抗體 : 今天我做實驗 : 壓出來一整片都是黑的 : 結果關燈發現整片menbrane都發亮 : 我很確定我二抗沒有給錯啦@@ 且也有很努力的wash乾淨 : 因為抗體是跟別人要的 : 且我同學他也沒有做過這個protein @@ : 有人跟我說 如果是 Polyclonal antibodies 的 : 他的專一性也會比較差 : 會是這個原因嗎? : 該怎麼改善呢? : 希望有做過的版友可以提供我一點意見 : 好讓我下次再試的時候知道該怎麼改進@@ : 感恩感謝~!!!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.137.117.70

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二抗比例是 1:10000 不過牌子我不知道@@
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ECL 是millipore的!~
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也還有很多其他的抗體也是 cell signaling的~
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不過其他的我壓過的倒是沒有遇過這種情形!
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用你的條件跑我的抗體很ok
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要不要請鄰居試試看你的抗體? 如果他也這樣, 你就換貨吧!
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