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討論串[方法] ligation的問題...
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#3
Re: [方法] ligation的問題...
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者blueashin (tRoMboNe pLaYer)時間17年前 (2008/09/15 01:48), 編輯資訊
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1.基本上. 有人說 vector : insert = 1:3. 這可能要測過DNA濃度來判斷,. 但是一般而言,ligation前,我會跑一張電泳,. 確定vector以及insert的亮度,. 然後再決定他們的比例,. 2.. ligation能不能成功,有很多關鍵,. Restriction
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#2
Re: [方法] ligation的問題...
推噓2(2推 0噓 3→)留言5則，0人參與, 最新作者dreamysky (新綠園說不關了)時間17年前 (2008/09/15 01:01), 編輯資訊
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我是做四度C O/N. 不是PCR 產物. 是從A vector 切下來接到B vector. 因為濃度的關係. 我沒辦法做到E大說的5 ul. 我比較擔心的是ATP. 要怎麼回溫比較不會degrade?. 我是拿一部分來做BamH1 & Nde1 digestion判定有沒有接進去. 有沒有接進去
(還有143個字)
#1
[方法] ligation的問題...
推噓5(5推 0噓 2→)留言7則，0人參與, 最新作者dreamysky (新綠園說不關了)時間17年前 (2008/09/13 16:24), 編輯資訊
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我有一段要接進去的gene 大小約1K. 可是他的前後接位都是EcoR1. vector 我有加CIAP 作用 37度 30 min. ligation volume控制在20 ul. mol為 Vector: 0.7 pmol. gene : 6 pmol. 2 unit T4 ligase (g
(還有65個字)
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