Re: [求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?
※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯沖嗎?)》之銘言：
: 我是用TA後的plasmid來切我的insert
: ※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯沖嗎?)》之銘言：
: : 我最近正在接一段基因
: : vector:5.8kb
: : insert:700bp
: : 酵素切位:BamH1跟EcoRV
先問這兩個都是vector上還是自己設計的就是在primer上
如果都是在vector何不試試其他的不要用平頭的
: : 我切膠完之後，做膠純化
: : (ps. 可以順便問一下要如何做，純度跟濃度才會高?)
: : 然後ligation時，insert:vector=3:1
: : 放在4度下過夜
: : 可是我一直做不出來，我也放過16度過夜
: : 溫度啊那是試用室溫看看
再來就是
你的buffer 出問題了
ATP額外加吧
除非你有習慣一買來就把BUFFEER分裝
不然滿容易ATP就壞了
還是接不上去
: : 想請高人指點迷津
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