[求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?

看板Biotech作者 (所有人都跟我犯沖嗎?)時間18年前 (2008/01/23 00:26), 編輯推噓4(4推 0噓 3→)
留言7則, 5人參與, 最新討論串1/7 (看更多)
我最近正在接一段基因 vector:5.8kb insert:700bp 酵素切位:BamH1跟EcoRV 我切膠完之後，做膠純化 (ps. 可以順便問一下要如何做，純度跟濃度才會高?) 然後ligation時，insert:vector=3:1 放在4度下過夜 可是我一直做不出來，我也放過16度過夜 還是接不上去 想請高人指點迷津 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.98.66
推
01/23 00:36, , 1F
試試TA clone完，增量後再切來皆看看...
01/23 00:36, 1F
推
01/23 01:21, , 2F
用真空抽乾就可以讓濃度變高囉
01/23 01:21, 2F
→
01/23 01:47, , 3F
我做膠純化之後的260/230都是0.多，why?
01/23 01:47, 3F
推
01/23 13:34, , 4F
放室溫 o/n 試試
01/23 13:34, 4F
推
01/26 18:17, , 5F
我們老師說一邊blunt end一邊sticky end的最難接了 orz
01/26 18:17, 5F
→
01/26 18:18, , 6F
我也做過這樣的clone(RE不一樣) 也是試了很久 最後換別
01/26 18:18, 6F
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01/26 18:20, , 7F
的RE了... 實在是沒時間耗阿 有原po可能換切位嗎?
01/26 18:20, 7F
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