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作者 windyflyer 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共78則

限定看板：Biotech

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[求救] THP-1 到底該貼還不貼?

[ Biotech ]21 留言, 推噓總分: +10

作者: jk2300191 - 發表於 2019/09/06 16:20(6年前)

19^F推windyflyer: 我自己的經驗 THP-1喜歡又酸又擠的環境所以請1/2分10/08 15:51

20^F→windyflyer: 讓他長年處在擁擠的flask中他就會長的又圓又飄XD10/08 15:51

[求救] 螢光蛋白fusion protein 表現

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +3

作者: windyflyer - 發表於 2017/03/23 14:35(8年前)

7^F→windyflyer: 有但沒看到任何shift@@"03/23 18:56

8^F→windyflyer: 已經貼細胞下去要收RNA了不過對於沒螢光/沒protein03/23 18:56

9^F→windyflyer: 這件事感到疑惑QAQ03/23 18:57

18^F→windyflyer: 我重新clone一次之後有壓出來了~位置都對T_T06/22 21:44

[求救] Q-PCR primer秀逗?

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +3

作者: dorisaq2791 - 發表於 2015/07/11 19:59(10年前)

5^F推windyflyer: 這樣方法拿到的primer的確有機率會怪怪的07/30 22:45

6^F→windyflyer: 我們家之前也用過一陣子但實在不穩定所以後來還是換07/30 22:45

7^F→windyflyer: 訂來是粉狀的07/30 22:45

Re: [求救] 如何克服摸老鼠

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +4

作者: Fongshin - 發表於 2015/06/09 12:37(10年前)

6^F推windyflyer: 呃題外話是真的假的為啥我一點感覺都沒有XD07/30 23:11

[求救] promoter的PCR

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +4

作者: storm780121 - 發表於 2015/04/25 23:04(10年前)

13^F推windyflyer: 我...我當初是從中間剛好有酵素切位分兩半再接起來07/30 23:20

14^F→windyflyer: 然後才發現後面沒問題問題出在前半最後前半用合成07/30 23:21

[求救] 養菌用的agar

[ Biotech ]31 留言, 推噓總分: +6

作者: windyflyer - 發表於 2013/09/24 18:19(12年前)

4^F→windyflyer:我們一直是在hood倒盤的~09/24 19:46

11^F→windyflyer:因為一開始用1.5%粉末混濁狀況會更嚴重加上版上有查到09/25 10:27

12^F→windyflyer:1%才改的以前也是用1.5%+109/25 10:27

13^F→windyflyer:其實自配之前也用過也沒問題是換了agar之後開始的09/25 10:27

14^F→windyflyer:詭異的點在於連換兩家都一樣...09/25 10:28

15^F→windyflyer:直接拿去煮ok 可是不知道為啥搭了LB就不行這兩個分開09/25 10:28

16^F→windyflyer:都很好Orz09/25 10:28

17^F→windyflyer:我們之前一樣的配方做法都ok 是換了GM的agar開始變這樣09/25 10:29

18^F→windyflyer:壓力沒問題因為拿去隔壁系的也是一樣狀況...09/25 10:30

19^F→windyflyer:調pH值唷..以前沒這樣做過._.可以講解一下嘛XD09/25 10:31

23^F→windyflyer:我有試過加熱板先煮不過大概只有30min滾了我就拿去滅09/25 11:40

24^F→windyflyer:了先溶LB再加agar我會試試看!09/25 11:40

28^F→windyflyer:喔忘記說實驗室有人直接拿agar加水去煮是會溶的不過09/25 13:06

29^F→windyflyer:那時候我人不在現場就是了..09/25 13:07

Re: [求救] Dual-Luciferase 的 Internal control

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +1

作者: puec2 - 發表於 2013/07/22 22:10(12年前)

15^F推windyflyer:nano很強非常強我們家測之前三小時換medium還會有幾百07/29 14:54

16^F→windyflyer:萬的讀值!不過有趣的是nano不能跟renilla一起表現因為07/29 14:54

17^F→windyflyer:co-transfect的細胞刮下來測renilla會跟著飆上去..07/29 14:55

[求救] mutation的問題

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +1

作者: sa74283 - 發表於 2012/12/07 15:22(13年前)

7^F推windyflyer:我也用過這組kit 提供我的方法給你參考~12/24 18:42

8^F→windyflyer:我前面步驟都照protocol 但是P完等確定冷卻後(通常都偷12/24 18:43

9^F→windyflyer:懶冰4度O/N)然後再加入DpnI反應接著取10ul去transform12/24 18:43

10^F→windyflyer:我用他提供的competent cell很難長12/24 18:44

11^F→windyflyer:難長colony 這是我的方法啦@@"有點偏方XDD12/24 18:44

12^F→windyflyer:用他的competent cell很難長所以我用我們家自己做的12/24 18:45

[求救] western blot transfer

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +2

作者: piano0525 - 發表於 2012/12/02 14:17(13年前)

9^F推windyflyer:可以在此偷偷求transfer buffer(含methanol)配方嗎?12/24 18:56

10^F→windyflyer:我們家自從某一次搞丟以前的transfer buff配方用隔壁12/24 18:56

11^F→windyflyer:實驗室的之後都有tran不乾淨的狀況從35kDa就會殘留12/24 18:57

Re: [求救] 出生乳鼠的標記方法

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +1

作者: reinherd - 發表於 2012/09/15 11:45(13年前)

3^F推windyflyer:原來如此還有-w-?09/26 11:16

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