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作者 simonmiho 在 PTT [ Chemistry ] 看板的留言(推文), 共42則
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26F推:可以用極性低些的mobile phase 試試..有可能是compound08/11 19:58
27F→:卡在column內沒出來.如果肉眼都看的到..detector應該看08/11 19:59
28F推:的到.不然還有種可能..曾經有人應該HPLC的管子是金屬材08/11 20:03
29F→:質..而吸附在管內面...不過這個機率應該很低很低....08/11 20:05
13F推:LC的分類除了管柱內徑跟packing particle size來分類外04/04 23:40
14F推:是為了達到最佳的線性流速(Linear velocity)..加上04/04 23:45
15F→:sample loading的size..而有製備級,半製備級, 分析級04/04 23:47
16F→:微量級, capillary and Nano scale..都是為了求得更好04/04 23:47
17F→:的理論板數..將不同物質給分開..04/04 23:49
15F推:0.5 mL/min流速, 250x4.6的C18 column, 五分鐘那坨02/05 00:10
16F→:基本上就是flow through, 東西幾乎沒被column抓住..02/05 00:11
17F→:所以收peak,是用C18 semi-prepare的column理論上沒有02/05 00:12
18F→:什麼分離效果..如果還是要收peak的話, 如果分析時column02/05 00:13
19F→:溫度設低(10~15度C), 雖然peak tailing 會嚴重, 但可以02/05 00:16
20F→:增加在column內滯留的機會..不然分析時用150x3 um的分析02/05 00:17
21F→:column試試..(不過如果連HILIC都抓不住..難道是分子量)02/05 00:18
22F→:很小又極性很大?? 或是可以考慮SAX/SCX來分極性物質02/05 00:21
37F推:看到加酸跟天然物萃取突然想到..MP加酸目的是使目標物的02/06 00:47
38F→:的charge能不易受pH改變而改變..TFA跟醋酸很常用..mass02/06 00:48
39F→:上也不會影響..我要說的是想到通常天然物的compound含氮02/06 00:50
40F→:的function group不少..所以在中性或酸性的MP時,02/06 00:51
41F→:compound的極性還是會很大,使得不易停留在C18 column中02/06 00:52
42F→:可使用有end-capping以及modified的C18(也就是能用於高)02/06 00:53
43F→:pH的column; 各大廠都有..應該都還可以到pH10~12...02/06 00:54
44F→:如此可以改善peak tailing跟RT很早就出來~~02/06 00:55
46F推:至於MP的選擇..mass能用得不多...氨水可以試試...02/06 01:00
1F推:run的mobile phase(MP)跟打進去的MP是同一時間配的嗎?01/23 03:15
2F→:如果是的話..會不會是sample loop (手動的話是多向閥)01/23 03:16
3F→:那邊會不會髒掉了?01/23 03:16
4F→:不過確實SEC的column的solvent front有時候會有訊號~~01/23 03:17
5F→:所以你15/18分鐘會有peak..不過通常peak shape 會不好!01/23 03:18
17F推:SEC是靠分子量.所以在固定RT會出來...還有RI對溫度01/24 02:43
18F→:的改變也算靈敏..不過你是從MP取出後再打..應該也沒差01/24 02:46
19F→:一般Water or Agilent的LC autosampler 洗針是只有洗針01/24 02:49
20F推:的外表..針的內部要用其他程式或多洗幾次才會乾淨..01/24 02:51
21F→:既然autosampler沒問題的話...就只剩下vial及vial的墊片01/24 02:52
22F→:內的東西被MP溶掉後打進去了..雖然這可能性很小...01/24 02:53
4F推:可能in-line的degasser(不確定有沒) 效果不好11/22 23:44
5F推:流速很高嗎? 使得大量水/MeOH混合, 氣泡來不及消失..11/22 23:47
6F→:而且50%MeOH時壓力是最高的, 有超過column的限制嗎?11/22 23:48
2F推:可參照美國藥典(USP)標訂KHP (酸鹼中和)來做...11/23 00:01
2F推:蛋白質的sample通常用硝酸微波消化..有時可以加少許HCl.09/19 22:17
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