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作者 rebirth 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共55則
限定看板:Biotech
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15F→: 看起來是stable pool不是stable clone,pool是heterogen09/24 07:56
16F→: eous population ,一群表現量有高有低甚至沒表現的混合09/24 07:56
17F→: 細胞群,或許生長時間久之後這群pool變成只剩下沒表現的09/24 07:56
18F→: 細胞,而沒有luc activity09/24 07:56
19F→: 另外你們selection的時間多久,有確認真的已經是stable09/24 07:59
20F→: cell line了嗎? luc cassette 真的有insert into host09/24 07:59
21F→: genome了嗎?09/24 07:59
22F→: 個人經驗是挑選stable clone而非pool,確認已經建立stab09/24 08:03
23F→: le line,然後放大成MCB凍存與使用09/24 08:03
2F→: PCR 有positive control and negative control? 如何判09/07 21:09
3F→: 斷沒有insert? 另外看敘述應該是plasmid transformatio09/07 21:09
4F→: n. 有沒有考慮直接抽plasmid (DH5a)做RE check?09/07 21:09
9F→: incubator之外,cell culture room也應該要一併清潔比較01/24 08:26
10F→: 好,感覺整個環境都不是很乾淨01/24 08:26
26F→: 你要不要換實驗室比較快阿10/24 10:09
27F→: expression vector基本設計問題實驗室沒人可教只能上網10/24 10:11
28F→: 問網友...10/24 10:11
1F推: 2號vector的competent cell是否是endA+ strain04/09 18:42
2F→: 很像endo沒有去除造成plasmid degraded smear pattern04/09 18:47
4F推: 先colony PCR screening,挑出對的size insert10/03 19:03
5F→: 再抽plasmid做 RE check10/03 19:04
10F推: TA vector不加insert直接transform看看?看看有沒有污染10/03 21:10
11F推: 或許兩種都該試試,天曉得是DNA fragment還是plasmid10/03 23:22
12F→: contamination10/03 23:23
6F推: 氣泡,太熱的時候就倒會有的01/29 12:13
12F推:你的問題是抽不到RNA,還是抽得到但是純度差?02/13 21:06
11F推:只有我想要建議原po換lab嗎XD11/08 18:24
13F→:RNA放在-80兩個月比cDNA放4度一個月好多了 重轉就對了05/13 23:29