作者查詢 / monkey60391
作者 monkey60391 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共29則
限定看板:Biotech
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9F推: plasmid用kit抽出來的濃度很高,11/09 16:09
10F→: 所以不用像DNA片段要再透過PCR放大才看得到11/09 16:09
11F→: 通常plasmid跑膠應該會用限制酶切一兩刀11/09 16:09
12F→: 去看片段大小有沒有符合預期吧11/09 16:09
1F推: 會不會是sample的問題,沒有破乾淨或有一些殘渣之類05/15 18:34
2F→: 看你marker跑得很漂亮應該不會是western步驟的關係05/15 18:34
1F推: 因為抗藥性原因很多…所以你之前為什麼會覺得該基因04/08 16:41
2F→: 的point mutation是導致抗藥性的原因呢?有ref可以04/08 16:41
3F→: 佐證你的假設嗎?你有用未突變的基因塞回去表現看看04/08 16:41
4F→: 抗藥性有沒有消失嗎?04/08 16:41
3F推: 用isotope label H3?09/25 17:27
4F推: 之前我學姐也是這樣結果她09/23 17:07
3F推: 同意樓上,不是應該ligation完直接transform,挑col09/15 04:16
4F→: ony抽plasmid出來RE跑膠嗎09/15 04:16
5F推: 以前做T4 ligation都是放16 ℃ o/n09/15 04:20
4F推: predict不一定準,我純化His tag 蛋白也是差不多會07/01 15:29
5F→: 再比原來的蛋白+10 kda07/01 15:29
6F→: https://reurl.cc/O1NV1707/01 18:50
7F→: 可以看一下別人的討論,真的不放心就拿elution或bea07/01 18:52
8F→: ds去跑WB壓蛋白本身的抗體或His的抗體看看是不是和c07/01 18:52
9F→: ommassie的位置差不多就知道了07/01 18:52
18F推: Ecoli作的protein一般不會有PTM07/02 19:52
5F推: OMG這真的好神06/06 18:14
5F推: 有的midi kit會叫你多洗幾次buffer來去除endo, 通常04/11 13:23
6F→: mini/midi的手冊上都會寫怎麼處理04/11 13:23
6F推: 就照老闆說的做,養幾代之後再自己重複實驗,就可以02/13 12:32
7F→: 知道代數到底會不會影響你的實驗02/13 12:32
9F推: 情況允許就每次subculture順便種要實驗的細胞啊,一02/14 02:49
10F→: 個禮拜至少可以收2-3次吧02/14 02:49
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