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作者 ljii 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共107則

限定看板：Biotech

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[求救] Western blot 系統租借

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +10

作者: lilun0103 - 發表於 2013/10/05 23:55(10年前)

6^F推ljii:sent from my android XD 可能連電腦也在借....10/06 11:26

[討論] hif1 alpha實驗細節

[ Biotech ]50 留言, 推噓總分: +7

作者: jas123654 - 發表於 2013/09/28 18:35(10年前)

48^F推ljii:生物實驗倒是三不五時會有那種in his hands only的結果10/01 09:26

[求救]請問繼代細胞方法

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +8

作者: jkq - 發表於 2013/09/18 14:25(10年前)

7^F推ljii:stem cell不就是要一團一團的passage嗎???@@09/19 16:05

8^F→ljii:要練習拿HEK練習最好09/19 16:06

[求救] paraneoplastic syndrome的antibody

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +1

作者: imhotept - 發表於 2013/09/08 21:19(10年前)

3^F推ljii:2008已經remission了, 這次bHCG又沒高,沒有原發腫瘤的證據09/09 07:55

4^F→ljii:為何會先押寶paraneoplastic neurologic syndrome? 我覺得09/09 07:56

5^F→ljii:聽起來remove port-A related thrombosis機會還更大09/09 07:56

6^F→ljii:至於請版友代驗,你列出這一堆antibody, 全部買起來不便宜,09/09 07:57

7^F→ljii:IHC (我猜你是要染IHC吧? 不是western?)用掉reagent也都是錢09/09 07:58

8^F→ljii:所以會是不小的人情. 如果有經費的話,建議你直接找看有沒有公09/09 07:58

9^F→ljii:司在代驗的. 不然就打電話問台灣各大center有沒有在驗的09/09 07:58

[求救] 細胞培養液呈混濁狀，要如何找出感染源??

[ Biotech ]39 留言, 推噓總分: +11

作者: ab10169ab - 發表於 2013/08/16 13:41(11年前)

23^F推ljii:放一盤純medium在incubator裡.看幾天後會感染.如果一直都08/17 01:19

24^F→ljii:沒感染那就是你凍的細胞有問題,或是管裂掉解涷過程感染08/17 01:20

[求救] 關於shRNA knockdown效果

[ Biotech ]26 留言, 推噓總分: +5

作者: jordan01405 - 發表於 2013/08/15 23:52(11年前)

2^F推ljii:這可能性太多了,扣除技術性問題,最可能的就是這個shRNA不work08/16 02:13

3^F→ljii:一般都是作好幾個shRNA看哪個work,效果最好08/16 02:13

4^F→ljii:比較保險的作法是找paper有證實的shRNA來用08/16 02:14

5^F→ljii:如果是照著一般guideline來設計, 就要多作幾個08/16 02:15

[求救] DNA gel bands 的 pattern 很奇怪

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +4

作者: poohwl - 發表於 2013/07/03 16:58(11年前)

14^F推ljii:band歪是gel作的不好, 沒有搖勻或微波不夠久或沒有solidify夠07/06 00:16

15^F→ljii:至於多條band, 可能是anneal temp太低, primer專一性不夠,07/06 00:17

16^F→ljii:不然就是根本實驗無誤, 是同個mRNA的alternavtive splicing07/06 00:18

17^F→ljii:不過你沒有提到你預期的band多大,還是根本就是預期有不同大小07/06 00:19

[求救] 細胞培養的數量or密度太低

[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +4

作者: jhliu78 - 發表於 2013/05/29 16:58(11年前)

13^F推ljii:condition media在不同種類細胞定義不同,但概念都類似,05/30 13:15

14^F→ljii:就是"不是"fresh media, 而是fresh media先culture某種細胞05/30 13:16

15^F→ljii:細胞會分泌成份進media中,此時這個media就叫condition media05/30 13:16

16^F→ljii:然後拿condition media去culture你最終要養的細胞05/30 13:17

17^F→ljii:這樣講很籠統,但不同細胞種類狀況就不同. 例如iPS cell,或是05/30 13:18

18^F→ljii:ES cell, 通常會養在一層mouse embryonic fibroblast上. 但你05/30 13:18

19^F→ljii:也可以不用養在MEF上,而是把泡過MEF一天的media拿來當iPS cel05/30 13:19

20^F→ljii:的media05/30 13:19

23^F→ljii:最好是先查看看你這種細胞種類的condition media是怎麼作05/30 14:03

[求救] RT-PCR

[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +7

作者: kelly2013 - 發表於 2013/05/13 13:20(11年前)

2^F推ljii:同樓上,先確定你的藥會不會誘發GAPDH. 再來是放4度的問題,05/13 14:52

3^F→ljii:你的CDNA是用H2O elute嗎? 那在4度C放這麼久有可能會acid05/13 14:53

4^F→ljii:hydrolysis. 如果這樣的話你的cDNA量就不準了05/13 14:53

5^F→ljii:如果cDNA是在TE裡面會比較stable,但放那麼久也難說,尤其你要05/13 14:54

6^F→ljii:定量. 想必mRNA應該是安全的冰在-20或-80吧,何不重新作cDNA?05/13 14:55

[求救] quikchange kit 台灣代理商??

[ Biotech ]35 留言, 推噓總分: +7

作者: silverberry - 發表於 2013/05/08 11:29(11年前)

30^F推ljii:我的經驗是Dpn1可以直接加進PCR product裡也會work. 不過有時05/13 14:59

31^F→ljii:間的話多一步purify無害05/13 15:00

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