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作者 jason0919 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共29則

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[求救] 蛋白質萃取去除DNA

[ Biotech ]2 留言, 推噓總分: +1

作者: chang0115 - 發表於 2013/10/31 11:30(10年前)

1^F推jason0919:去除EDTA後請加5mM MgCl2, DNase I才會有效果11/01 12:05

2^F→jason0919:稍微shaking 15min11/01 12:07

Re: [求救] 有沒有人用過gel filtration???

[ Biotech ]23 留言, 推噓總分: +4

作者: premire - 發表於 2011/05/02 18:02(13年前)

1^F推jason0919:鹽濃度和分離效率無關只要你的東西可以流的出來就好05/02 20:20

2^F→jason0919:我沒特別加NaCl 用這種column也是可以分離關鍵是你的溶05/02 20:21

3^F→jason0919:液的離子性夠大到讓你的蛋白不會黏在管柱上05/02 20:22

4^F→jason0919:你可以先try 只打buffer進去看小分子什麼時候流出來05/02 20:23

5^F→jason0919:還沒聽過小分子也流不出來的既然你用手動你怎麼detect05/02 20:24

6^F→jason0919:你的小分子?05/02 20:24

7^F→jason0919:照你的講法是用手動你用導電度計測變化?05/02 20:34

10^F推jason0919:前兩篇已經說明了 280nm吸收看不到glutathione05/03 16:15

11^F推jason0919:就算是用214, 220nm這些對有單鍵的東西吸收都很高看不05/03 16:19

12^F→jason0919:到變化也是正常的05/03 16:20

16^F推jason0919:您為何不加glutathione到buffer裡看看吸光值有何變化05/03 18:43

17^F→jason0919:但我不太認為你會看的到05/03 18:44

18^F→jason0919:想了一下搞不好可以05/03 18:53

19^F→jason0919:我只是很好奇你為什麼會想用吸收值來看它05/03 18:56

20^F→jason0919:230不是一個很好的地方啊頗少看到人看這個點05/03 18:58

21^F→jason0919:如果你看到說明書大概都是在用導電度看最直覺05/03 19:11

[求救] 有關Tricine-SDS-PAGE的Buffer。

[ Biotech ]22 留言, 推噓總分: +7

作者: jck0406 - 發表於 2010/03/29 17:50(14年前)

6^F推jason0919:他指的就是裡外...內外buffer分隔你要看電極線怎麼連的03/29 21:10

7^F→jason0919:內加cathode 外加anode 其實只差了SDS和一點比例而已03/29 21:11

8^F→jason0919:那篇我讀過照他跑的真的跑很久.....03/29 21:12

12^F推jason0919:bio-rad不是內外要分開嗎...沒裝好漏出來了吧...03/29 23:01

13^F→jason0919:tricine gel是專門分開小分子蛋白的操作適當的話至少03/29 23:02

14^F→jason0919:resolution會不錯吧染的好不好就看你們的染法了...03/29 23:02

15^F→jason0919:通常SDS-PAGE只要有load 1ug以上的量都可以染的不錯03/29 23:06

[求救] His tag 的純化

[ Biotech ]24 留言, 推噓總分: +8

作者: lovelara - 發表於 2009/09/27 02:04(14年前)

19^F推jason0919:.22可以濾菌所以manual才會建議這樣不過sample過.22不09/29 23:32

20^F→jason0919:好通的話.45也可以太大會損壞機器09/29 23:32

21^F→jason0919:至於重力純化其實可以接上一根syringe 有螺紋的...09/29 23:34

22^F→jason0919:慢慢通大約數秒一滴的速率就夠了09/29 23:35

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