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討論串[求救] 磷酸化蛋白
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#5
Re: [求救] 磷酸化蛋白
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者lovenainai (lovenainai)時間14年前 (2011/09/11 23:52), 編輯資訊
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你已經有這個蛋白質的抗體了. 加藥處理 做個 IP 去 pulldown pTyr/Thr/Ser. 然後看加藥處理後你的 protein +/- 不就好了.... --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 24.184.89.77.
#4
Re: [求救] 磷酸化蛋白
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Rarelay時間14年前 (2011/09/11 19:03), 編輯資訊
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你說的完全正確。. 所以如果反向 mutation，. 例如處理藥物會 phosphorylation,. 那突變成 A 就會變成 negative control，. 但是突變成 D or E 就必須要像是藥物處理過的表型。. 當然，. 任何一個實驗都只是一個角度，. 如果可以由完全不同的實驗概念
#3
Re: [求救] 磷酸化蛋白
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者saviora (颶風之翼)時間14年前 (2011/09/11 17:33), 編輯資訊
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假如這個(去)磷酸化的位置對於蛋白功能扮演相當重要的角色. 把這個位置做point mutation 就算藥物不是控制這個磷酸化的調節. 一樣會看到negative control 表型. 例如說把IkB的磷酸化位點的點突變 進而造成IkB不會被ubiquitination. 而一個未知的藥物A是調
#2
Re: [求救] 磷酸化蛋白
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者Rarelay時間14年前 (2011/09/11 16:21), 編輯資訊
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我不知道這個磷酸化位點是已知還是未知。. 假設他是已知的，. 你可以考慮將之突變成 A or D (E). 若你推測他是處理藥物會磷酸化，那就突變成 A，. 處理藥物應該會不受藥物影響，同 negative control 表型。. 你就可以確定磷酸化的確在藥物處理後細胞產生反應中扮演重要角色。.
(還有220個字)
#1
[求救] 磷酸化蛋白
推噓6(6推 0噓 8→)留言14則，0人參與, 最新作者lookfor0326 (find)時間14年前 (2011/09/09 18:41), 編輯資訊
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不好意思.... 想請教一個小小的問題. 由於目前的實驗是以藥物測試蛋白質的改變. 但WB結果顯示target蛋白質並無減少或增多的情況，. 於是想要去探討有沒有可能會是影響到target protein磷酸化，. 但因為手邊沒有target protein 磷酸化抗體可以用來測試這個問題，. 因此
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